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離子交換法(IEX)用于生物治療性藥物電荷變異體分析

瀏覽次數(shù):3568 發(fā)布日期:2014-5-13  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

Robert Birdsall,Thomas Wheat,and Weibin Chen

沃特世公司(美國馬薩諸塞州米爾福德市)

應(yīng)用優(yōu)勢
■ 通過自動化分析技術(shù)提高工作效率
■ 穩(wěn)健的方法開發(fā)為生物治療性藥物電荷變異體的確證和定量帶來一致且重現(xiàn)性良好的結(jié)果
■ 無需制備額外緩沖液,簡化方法開發(fā)過程并提高方法重現(xiàn)性

沃特世解決方案
UNIFI® 生物制藥平臺解決方案
ACQUITY UPLC® H-Class系統(tǒng)
ACQUITY UPLC可變波長紫外(TUV)檢測器
Protein-PakTM Hi Res SP SCX色譜柱
UNIFI科學(xué)信息系統(tǒng)

關(guān)鍵詞
Auto•Blend PlusTM 技術(shù),陽離子交換,抗體,IEX,SCX,色譜,生物分離,蛋白質(zhì),方法開發(fā),穩(wěn)定性

簡介
在表征和監(jiān)測治療性蛋白質(zhì)的質(zhì)量屬性時,電荷變異體分析非常關(guān)鍵。脫酰胺化、N端焦谷氨酸基團(tuán)修飾、異構(gòu)化、唾液酸化聚糖和C端賴氨酸裁剪等蛋白質(zhì)修飾作用都會導(dǎo)致電荷變異體的形成1。在某些情況下,這些變化會影響治療性蛋白質(zhì)的鍵合、生物活性、患者安全性和保質(zhì)期。

生物制藥行業(yè)通過離子交換色譜(IEX)和等電聚焦(IEF)凝膠電泳等方法來對電荷變異體進(jìn)行表征。離子交換色譜法使用方便、適用性廣并且分離度高,因此對于生物治療性藥物開發(fā)特別有用。

如果要對生物制藥開發(fā)過程中治療性蛋白質(zhì)的電荷異質(zhì)性進(jìn)行深入表征,就需要穩(wěn)定高效的IEX方法。在開發(fā)方法時,通常會對所有可能涉及到的實(shí)驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行全面評估,例如緩沖液/離子強(qiáng)度、緩沖液pH值、鹽梯度、流速和柱溫等。然而,想要系統(tǒng)性地評估各個實(shí)驗(yàn)參數(shù)對分離性能的影響,往往需要進(jìn)行冗長的迭代過程,這涉及到各種不同成分緩沖液的制備和測試。

緩沖液制備的差異可能會導(dǎo)致結(jié)果不一致,進(jìn)而延長方法開發(fā)時間。Waters® Auto•Blend Plus技術(shù)利用ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)的四元溶劑管理技術(shù),使用純?nèi)軇┖透邼舛刃揎梽﹥湟簛斫鉀Q這些問題。利用Auto•Blend Plus技術(shù)計算每種儲備液的混合百分比獲得所需pH值,從而減少錯誤、降低耗材用量并縮短開發(fā)時間。

UNIFI生物制藥平臺解決方案因集成了上述特性,非常適用于穩(wěn)定的方法開發(fā),并輕松實(shí)現(xiàn)自動化,從而提高工作效率。本應(yīng)用紀(jì)要旨在展示Auto•Blend Plus技術(shù)在使用離子交換(IEX)方法進(jìn)行電荷變異體分離方法優(yōu)化過程中的高效率和穩(wěn)定性。本應(yīng)用紀(jì)要使用嵌合單克隆抗體英夫利昔單抗作為治療性蛋白質(zhì)應(yīng)用示例。

下載應(yīng)用紀(jì)要請點(diǎn)擊:http://www.waters.com/waters/library.htm?cid=511436&lid=134776834&locale=zh_CN

發(fā)布者:沃特世科技(上海)有限公司
聯(lián)系電話:800(400)8202676 (免費(fèi)電話支持專線)
E-mail:Jackie_qian@waters.com

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