CompresstomeTM應(yīng)用II 基因功能研究：組織學連續(xù)切片
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儀器應(yīng)用手冊Volume 7 | ||
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CompresstomeTM應(yīng)用II 基因功能研究：組織學連續(xù)切片
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關(guān)鍵詞：組織學（Histology）, 基因功能（Gene Function）, 免疫組織化學（Immunohistochemistry）, 連續(xù)切片（Serial Sections）,振動切片機（Vibratome） | ||
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在基因功能的研究中，為了研究某種基因的功能或基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)時需要同時在一個動物上對多個基因進行突變操作。這一類分析兩個或多個基因的研究需要結(jié)合基因的原位雜交技術(shù)、基因表達蛋白的免疫組織化技術(shù)在發(fā)育的器官層面或組織切片的細胞層面來觀察突變操作所造成的影響。隨著更加先進的儀器的出現(xiàn)，研究技術(shù)也在不斷的更新。通過結(jié)合親脂性染料示蹤、原位雜交、免疫組織化學和組織學等多種技術(shù)從同一個動物中最大限度地獲取器官各個組織層面的結(jié)構(gòu)變化以及基因和蛋白表達的變化數(shù)據(jù)，使得基因敲除、基因表達與組織學的數(shù)據(jù)更加緊密的關(guān)聯(lián)起來。 | ||
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通過親脂性染料示蹤后，將樣本進行切片可獲得組織學切片數(shù)據(jù)。為了獲取厚度均一的連續(xù)切片我們推薦使用Compresstome VF-700振動切片機（Precisionary Instruments Inc., Greenville, North Carolina）。使用這種切片機使得切片的免疫抗原活性得以保存。冰凍切片機由于切片過程中染料泄露的問題而不適于此應(yīng)用。 | ||
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CompresstomeTM VF 700 | ||
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實驗設(shè)計示意圖：在同一個樣本中進行如下四個技術(shù)操作：一、染料示蹤；二、原位雜交顯示mRNA表達；三、免疫組織化學顯示蛋白的表達；四、組織學切片顯示原位雜交和免疫織織化學染色結(jié)果。 |
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注：新一代CompresstomeTM振動切片機通過瓊脂凝膠將樣本包埋在樣本管中，并施以輕微的壓縮使得組織被固定得更加牢靠，因此獲得更好的切片效果（切片厚度更均一，切片表面更加光滑平整）。 | ||
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相關(guān)鏈接：“Combining Lipophilic dye, in situ Hybridization, Immunohistochemistry, and Histology” | ||
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