天天干亚洲_99久久免费国_亚洲国产精品成人久久久软件_亚洲成av人**亚洲成av**_精品中文字幕在线AⅤ_男女真实毛片视频图片

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 從組織和培養細胞中制備輕線粒體組分

從組織和培養細胞中制備輕線粒體組分

瀏覽次數:2222 發布日期:2011-2-9  來源:www.pricells.com.cn
                              從組織和培養細胞中制備輕線粒體組分

試劑和器材: 
1. 勻漿介質:0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;
2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制劑;
3. 磷酸鹽緩沖液;
4. 低速冷凍離心機,配有30—40ml離心管的吊桶式離心轉子;
5. 高速離心機,配有30—40ml離心管的固定角轉子;
6. 用于肝臟:Potter-Elvehjem(聚四氟乙烯樹脂和玻璃)勻漿器(30—40ml),連接高轉矩橋式電動機(半導體開關控制);
7. 用于細胞:滾珠軸承勻漿器或帶23號或25號針頭的注射器;
8. Dounce勻漿器(寬松配制,Wheaton B型);
9. 20ml規格注射器(內徑約0.8mm),帶金屬套管針;

實驗方法:
   所有操作須在0—4℃下進行。
1. 對肝臟:用剪刀非常細微地剪碎組織(或使用組織切碎機),用勻漿介質轉移到Potter-Elvehjem勻漿器中(每2.5g組織使用10ml介質)。研杵研磨6次左右進行勻漿(500—700r/min);
2. 對細胞:在5ml磷酸鹽緩沖液中洗滌(1—3)×108個細胞,再換用勻漿介質進行洗滌。在3ml勻漿介質中混懸細胞,在滾珠軸承勻漿器中來回5次勻漿;
3. 800g下離心10min,沉淀核、細胞碎屑和未破碎細胞;
4. 傾倒或吸取(使用針管和注射器)上清,置于冰上;
5. 在寬松配制Dounce勻漿器中研杵研磨2—3次進行勻漿,使用10ml勻漿介質重懸沉淀(細胞則使用5ml);
6. 重復離心,合并上清;
7. 將合并的上清在3000g下離心10min;
8. 將第7步得到的上清在15000g下離心10min;
9. 用10ml(細胞對應5ml)勻漿介質重懸輕線粒體沉淀,在寬松配制Dounce勻漿器中用研杵輕輕地研磨2—3次;
10. 15000g下離心10min;
11. 在適當的介質中重懸沉淀用于分析或進一步處理;

發布者:武漢原生原代生物醫藥科技有限公司
聯系電話:027-87490190
E-mail:service@pricells.com.cn

標簽: 原代細胞
用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 中文字幕第一区第二区 | 国产真实乱免费高清视频 | 精品一区二区久久久久久按摩 | AV草草久久久久久久久久久 | 高清av免费观看 | 一区二区久久精品66国产精品 | 不卡的av一区二区 | 国产精品2| 国产精品色区在线观看 | 国产精品毛片va一区二区 | 99久久久国产精品免费调教sp | 成人免费视频亚洲 | 亚洲精一区二区三区 | a毛片| 久久精品视频免费播放 | 成人国产精品一区二区毛片在线 | 国产精品永久久久久久久www | 国产国语一级在线播放视频 | 国产精品嫩草影院永久一 | 欧美成人一二区 | 成人爽a毛片在线视频淮北 国产综合在线播放 | 97国产资源共享总站 | 亚洲日韩激情无码中出 | 在线观看av免费 | 色av一区二区 | 日产一二三四五六七区麻豆 | 久久久久久www | 操你了| 夜夜操天天射 | 久久久久久久久久免费高清 | 亚洲精品色综合av网站 | 国产欧美亚洲三区久在线观看 | 国产在线观看无码一区二区三区 | 国产精品久久久久一区二区 | 不卡中文字幕 | 国产亚洲精品成人av久久果冻 | 69精品久久久久久 | 成年网站免费观看 | 国产精品亚洲一区二区在线 | 亚洲成av人在线观看网址 | 亚洲国产精品18久久 |