流感疫苗生產的純化過程和設備
流感疫苗生產的純化過程和設備
流感疫苗生產的純化過程：
1. 已培養好的帶病毒的雞胚用75％酒精消毒；
2. 收集雞胚尿囊液：根據雞蛋大小收集量略有不同（每只6－10ml）；
3. 尿囊液初濾JST型10μm濾芯過濾；
4. 連續流離心機或超濾系統過濾
a. 連續流離心機：日立R13C，用12,000rpm，流量：每分鐘600－800ml，除去雜質，上清液用于透析濃縮；
b. Millipore超濾系統，0.45μm濾膜，除去雜質
5. 尿囊液的透析濃縮：用Millipore超濾器，1000KD膜包濃縮，濃縮后通常為尿囊液量的1/30；
6. 超速離心的病毒純化（略）；
7. 福爾馬林脫毒；
8. 乙醚裂解；
9. 100KD透析脫糖；
10. 去福爾馬林；
11. 去乙醚……
12. 幾種流行病毒抗原的混合（如H1N1+H3N2+H2N2）和稀釋
13. 加入穩定劑
14. 成品
離心純化需要準備的儀器和基本材料：
1. 儀器
a. 阿貝折射儀 Abbe refractometer （測蔗糖濃度）
b. Cole parmer 軟管泵：KH-77913-25
c. 紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀（有280nm，260nm波長的），可以是帶流動池及記 錄儀，也可以是帶標準樣品池的）
2. 梯度液
a. PB緩沖液PH7.3
b. 30％ w/w蔗糖液（Sucrose，Sigma，AR級）
c. 55％ w/w蔗糖液
d. 58％ w/w蔗糖液
3. 實驗器具
a. 50ml有刻度玻璃管 100支
b. 500ml有刻度燒杯 5支
c. 100ml有刻度燒杯 5支
d. 1000ml有刻度量筒 3只
標簽：
流感疫苗、超濾、核酸蛋白分析
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