兩款熒光顯微鏡的使用心得
作者：符薇，復旦大學生物醫(yī)學研究院
說到生物，大家就會想到一個一個形態(tài)各異的細胞。但是要觀察細胞形態(tài)的細微變化，一架性價比高的顯微鏡是必不可少的。 從列文虎克發(fā)明第一架光學顯微鏡至今，顯微鏡為了滿足觀察者的需要而不斷更新?lián)Q代。目前，生物細胞培養(yǎng)最常用的就是熒光顯微鏡，可以用于觀察綠色，紅色和藍色三種熒光。 另外，從觀察活細胞角度和固定細胞角度，又可以分為倒置顯微鏡和正置顯微鏡兩種。
先說說奧林巴斯的熒光顯微鏡，我使用的機器型號是OLYMPUS BX51（圖片來自網(wǎng)絡）。
之所以很多人選擇奧林巴斯的熒光顯微鏡，很大程度上是因為他們家的軟件設計的相當人性化。這款軟件功能非常強大，從圖像拍攝到圖像后處理一步到位，可以滿足你所能想到和想不到的多種拍攝細節(jié)要求。在圖像獲取方面，該軟件的活圖采集像素比較高，而且清晰度也很不錯，另外還配有圖像鎖定按鈕，很方便將觀察區(qū)域進行鎖定，方便多張相片的采集。在準備拍攝的時候，首先要做好照片的白平衡，這個對任何拍攝都十分重要。奧林巴斯的熒光顯微鏡設計了兩種白平衡調(diào)節(jié)模式，在白光模式下，以1cm左右的正方形聚焦框為中心，選擇周邊一鍵接觸式（one touch）或者周邊區(qū)塊選擇模式，都可以很容易的完成白平衡的設置。在熒光模式下，則聚焦框需要縮小到熒光區(qū)域，然后才可以進行白平衡校正。另外，他家的鏡頭也相當清晰，還配有活圖拍攝模式，支持一段時間的動畫拍攝，只要設好拍攝時間范圍，配上培養(yǎng)盒就可以實現(xiàn)活細胞的動態(tài)拍攝。在圖像處理方面，功能也比較齊全，可以加注標尺，也可以實現(xiàn)多色圖片的重疊效果制作，而且界面非常友好，對photoshop不太熟悉的拍攝者，如果有了這個軟件，一定會覺得方便很多。據(jù)說奧林巴斯的熒光顯微鏡軟件在前幾年銷量非常好，但近幾年受到盜版的影響，銷售量迅速下滑。畢竟這套價值數(shù)萬的軟件，除了功能強大外，售價也相當不菲，很多銷售代理奧林巴斯的熒光顯微鏡的公司為了降低成本，也常常給客戶安裝盜版的軟件，才影響了該軟件的銷售量。 說了那么多優(yōu)點，奧林巴斯的熒光顯微鏡的缺點究竟是什么呢？我覺得是40倍以上圖像的清晰度問題，因為超過20倍以上的物鏡，其觀察的清晰度就會受到影響。雖然他家也提供鏡頭切換模式，但效果改善不太明顯。不過如果大家不介意試試油鏡的話，奧林巴斯的熒光顯微鏡提供了100倍物鏡，在滴上油后的拍攝效果可以令大家滿意，甚至于細胞內(nèi)的小型細胞器和轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的熒光小顆粒有時都可以觀察得非常清楚，可以為文章發(fā)表提供很好的證據(jù)支持。
另一個要說的就是最近我們才添置的Leica熒光顯微鏡，型號為Leica DMI 300B（圖片來自網(wǎng)絡）。
說實話，我是在最近使用中才了解這個德國牌子的產(chǎn)品，產(chǎn)品的外觀感覺還是不錯的。據(jù)他們工程師說，他們的鏡頭性價比是比較高的，在使用中我也覺得他家的鏡頭清晰度可以算是中低價位產(chǎn)品中的佼佼者。而且對于那些經(jīng)費不是很充分的實驗室，買一個倒置顯微鏡，也可以同時要求工程師幫忙做一下小的改裝，就可以作為一臺正倒置兩用機器，也不失是一種不錯的選擇。但是有一個致命的弱點，就是他家的軟件，超級的不好用。雖然提供中英文兩種界面，但有很多缺點，首先白平衡的調(diào)節(jié)比較粗糙，另外不支持動態(tài)動畫的拍攝，還有就是活圖的捕捉像素過低，常常造成圖片顯現(xiàn)遲緩和焦距對不準的現(xiàn)象。在圖像的后續(xù)處理，也功能超少，必須借助photoshop等其他軟件的幫助，所以我只能說Leica熒光顯微鏡是一臺軟硬件相當不匹配的設備，我個人非常的不推薦他家的軟件。如果要裝一個奧林巴斯的軟件，他家的工程師收費比較高，個人覺得有點坑人。
眼睛是心靈的窗戶，而顯微鏡則是生物工作者的靈魂馬車，可以幫助我們通往更多神秘未知的生物領域。我們不僅要懂得選擇，還要懂得如何去駕馭這座馬車，才能達到事半功倍的效果。好的鏡頭加上好的軟件，才是兩股有力的韁繩，缺一不可。如何DIY一臺性價比高的顯微觀察設備，我的建議是貨比三家，綜合考慮，從成本到效益多方考慮，再作出一個符合自身定位的決定。
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