產品簡介
長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA, lncRNA)是一類轉錄本長度超過200nt的非編碼RNA,在表觀遺傳、轉錄及轉錄后等水平調控基因表達,廣泛應用于動植物生長發育、調控機理、疾病標志物篩選、疾病的分子診斷及基因藥物等研究。lncRNA測序是利用高通量測序技術對lncRNA進行檢測,能夠準確進行lncRNA鑒定及其靶基因預測,同時能分析mRNA序列及表達信息,兩者聯合分析挖掘其與特定生物學過程的調控關系。
產品優勢
采用鏈特異性去核糖體建庫方式,能夠同時分析lncRNA、mRNA和circRNA,確定兩條鏈的轉錄方向性,減少比對過程中的錯誤;
一次建庫測序,即可獲得mRNA、lncRNA、circRNA的標準分析及聯合分析,深入探究多組學調控網絡;
項目經驗豐富,實驗流程和生信分析流程成熟,數據可靠。
技術路線
結果展示
lncRNA鑒定
基于轉錄組拼接結果,首先與已知的lncRNA進行比較,去除組裝出來的已知轉錄本,對剩下的轉錄本進行lncRNA預測。將各軟件所識別出的lncRNA轉錄本進行統計,采用維恩圖直觀的展示各個方法預測出的lncRNA轉錄本共有和特有的數目。取4款軟件預測結果的交集,作為本次分析預測得到新的lncRNA 數據集進行后續的分析。
lncRNA分類
經過四款軟件預測得到的lncRNA分類結果進行餅圖展示,將lncRNA分為lincRNA、Antisense-lncRNA、Intronic-lncRNA及sense-lncRNA。
差異表達lncRNA篩選
通過火山圖(Volcano Plot)可查看lncRNA 在兩個(組)樣品中表達水平的差異,以及差異的統計學顯著性,有助于篩選與表型性狀相關的關鍵lncRNA。
差異表達lncRNA聚類分析
對篩選出的差異表達lncRNA 做層次聚類分析,將具有相同或相似表達行為的lncRNA 進行聚類,預測未知lncRNA可能具有相似的功能或參共同的代謝及信號通路。
差異表達lncRNA靶基因KEGG富集分析
差異lncRNA靶基因KEGG 富集散點圖是 KEGG 富集分析結果的圖形化展示方式。在此圖中,KEGG 富集程度通過 Rich factor、Qvalue 和富集到此通路上的基因個數來衡量。挑選了富集最顯著的 20 條 pathway 條目在該圖中進行展示,若富集的 pathway 條目不足 20 條,則全部展示。
常見問題
Q1:lncRNA測序物種適用范圍是什么?
A:有完善參考基因組的真核生物。
Q2:lncRNA文庫為什么需要去核糖體鏈特異性建庫?
A:(1)通過鏈特異性建庫,可以確定轉錄本是來自正義鏈還是反義鏈,提高基因定量和基因注釋的準確性;(2)只有部分lncRNA的3’端帶有polyA結構,因此,采用去核糖體建庫,能夠獲得更全面的lncRNA信息。
Q3:lncRNA靶基因如何預測?
A:基于lncRNA與其靶基因的作用方式,采用2種預測方法: (1)lncRNA調控其鄰近基因的表達,主要根據lncRNA與gene的位置關系預測,lncRNA 100kb范圍內的鄰近基因為其靶基因; (2)通過樣本間 lncRNA 與 mRNA 的表達量相關性分析方法來預測 lncRNA的反式靶基因。此方法需要一定樣品數量保證其預測的準確性,因此當樣本量小于5時不進行此項分析,結果為空。
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北京果殼生物科技有限公司, 專注多組學與分子檢測技術的研究和應用。公司成立于2017年,創始團隊深耕基因檢測領域,歷任著名科研機構和上市公司骨干崗位。
公司在北京設有分子研發中心,占地面積約1500㎡,搭載Illumina iScan、NovaSeq 6000、10x Genomics、MassARRAY、KASP等中、高通量檢測平臺,為科研客戶提供多組學研究的綜合性解決方案。2020年,公司在成都建立臨床醫學檢驗所,具備臨床基因擴增檢驗資質,占地面積約5000㎡,為西南地區較大的實驗基地之一。擁有大規模基因組信息檢測、數據分析能力,標準的質量控制流程,能夠有效支撐臨床實踐過程中的檢測項目實施需求。
果殼生物的基因芯片平臺處于業內領先地位。公司先后自主研發ASA-CHIA芯片和GUOKE 50K芯片,廣泛應用于科研隊列研究和遺傳病篩查領域,大大降低了分子診斷技術在終端的使用成本,目前檢測能力高達10000例樣本/周。
果殼生物目前已累計服務全國300余家科研院所、三甲醫院,完成50萬余份樣本的基因檢測工作,與全球近20位分子診斷領域的頂尖科學和醫學專家建立深度合作,橫跨基礎研究、出生缺陷防控、個體化基因檢測等多個領域,致力于讓領先的基因組學檢測技術發揮更大的應用價值。
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