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小分子單克隆抗體標記條件

小分子單克隆抗體標記條件


Small molecule monoclonal antibody marker condition
小分子單克隆抗體標記條件
服務類別:免疫與抗體總訪問:795
最后更新:2018-7-5半年訪問:3
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小分子單克隆抗體標記條件

金墊標記條件:

a. 1 ml 金液(20nm 左右)+30 微升 ( 1%K2CO3)+ 5mg/ml 抗體 1 ul,標記量為 5 微克蛋白/ ml 金液。( 先加碳酸鉀還是先加抗體?)

b,室溫振蕩. 20-30 分。

c. 加封閉液 20 ul/ml,室溫振蕩.20- 30 分

d. 離心 12000 轉,10 分

e. 150 ul 復溶液復溶(PH8.2),鋪金

F. C 線劃線: 羊抗鼠 1:30-1:100; T 線劃線: 做梯度。1:10-1:100

注意事項:

  • 每種蛋白抗原的物理性質不同,所以不能用一貫的千篇一律的加氯化鈉的式看穩定性,要看最終 T 線顏色的深度。
  1. ( 每個項目期初必須做兩個條件:1 是先加碳酸鉀后加抗體;2 是先加抗后加碳酸鉀,每種抗體不同,先后順序直接決定線條的有無)。
  2. 當標記時或者吹干后出現發紫,發灰,用保護劑便可解決 。

4,1%K2CO3 配置是 1g 碳酸鉀加到 100ml 水里。

 

目前發現 RACT,FF3C11,cap(11E11), cpfx(7E6), TC10E5 等單抗都是先加抗體后加碳酸鉀.

如有疑問請致電山東綠都生物食品安全檢測事業部 武經理 18266598399

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