細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)常見問題解答第三彈之試劑選擇與保存指南
在前兩期中，我們分別探討了細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)中的常見問題以及檢測(cè)儀器的選擇與操作細(xì)節(jié)，為細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)工作提供了全面的指導(dǎo)。然而，細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)領(lǐng)域的復(fù)雜性遠(yuǎn)不止于此，試劑的選擇、保存條件及其與檢測(cè)方法的匹配同樣對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響。
本期，我們將聚焦于細(xì)菌內(nèi)毒素試劑的相關(guān)問題，旨在幫助相關(guān)從業(yè)者更加深入地理解試劑在細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)中的關(guān)鍵作用，進(jìn)一步提升檢測(cè)工作的精確性和效率。
一、細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑的定義
細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑是指一類專門設(shè)計(jì)用于僅與細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生反應(yīng)的檢測(cè)試劑。與之相對(duì)，常規(guī)的鱟試劑除了能夠檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素外，還可能與真菌細(xì)胞壁成分如（1→3）-β-D-葡聚糖發(fā)生交叉反應(yīng)。
因此，細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑在檢測(cè)過程中提供了更高的準(zhǔn)確性和特異性，避免了因非細(xì)菌內(nèi)毒素成分引起的假陽(yáng)性結(jié)果。
二、單次檢測(cè)與多次檢測(cè)的區(qū)別
（一）單次檢測(cè)：在這種檢測(cè)方式中，單次分量的鱟試劑已預(yù)先被添加到反應(yīng)試管中。檢測(cè)時(shí)，只需將一定體積的測(cè)試溶液加入試管，即可進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測(cè)。這種方式簡(jiǎn)化了操作步驟，適用于快速、高效的檢測(cè)需求。
（二）多次檢測(cè)：在多次檢測(cè)中，鱟試劑首先需要用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)用水進(jìn)行溶解。然后，將溶解后的鱟試劑按一定等分量分配到反應(yīng)試管或微孔板中，供后續(xù)多次檢測(cè)使用。這種方式雖然操作相對(duì)復(fù)雜，但能夠靈活應(yīng)對(duì)大量樣本的檢測(cè)需求，且降低了試劑的浪費(fèi)。
三、試劑的保存條件與期限
為了確保試劑的有效性和準(zhǔn)確性，所有試劑都應(yīng)冷藏保存。具體保存條件和期限如下：
▶▶Pyrotell® MTV（凝膠法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，直至產(chǎn)品有效期結(jié)束。
▶▶Pyrotell® STV（凝膠法鱟試劑）：同樣應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，直至產(chǎn)品有效期結(jié)束。
▶▶Pyrosate®（凝膠法內(nèi)毒素快速檢測(cè)試劑）：可在2℃至25℃之間保存，直至產(chǎn)品有效期。
▶▶Pyrotell®-T（濁度法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，并在復(fù)溶后于2-8℃下保存24小時(shí)，或-20℃下凍存3個(gè)月（只能凍融一次）。
▶▶Pyrochrome®（顯色法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，并在復(fù)溶后于2-8℃下保存8小時(shí)（不能凍存）。
▶▶PyroSmart NextGen® (重組鱟試劑)：鱟試劑和復(fù)溶緩沖液應(yīng)儲(chǔ)存于2-8℃環(huán)境中。使用前需恢復(fù)室溫至少30分鐘，并在復(fù)溶后室溫放置，于3-20分鐘內(nèi)使用。
▶▶細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（CSE）：0.5μg/vial的CSE（E0005）應(yīng)在2-8℃下保存，并在復(fù)溶后不超過4周內(nèi)使用（不能凍存）。系列稀釋前需至少渦旋30秒。125μg/vial的CSE（E0125）同樣應(yīng)在2-8℃下保存，并在復(fù)溶后不超過3個(gè)月內(nèi)使用（不能凍存）。系列稀釋前也需至少渦旋30秒。
本期，我們將聚焦于細(xì)菌內(nèi)毒素試劑的相關(guān)問題，旨在幫助相關(guān)從業(yè)者更加深入地理解試劑在細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)中的關(guān)鍵作用，進(jìn)一步提升檢測(cè)工作的精確性和效率。
一、細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑的定義
細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑是指一類專門設(shè)計(jì)用于僅與細(xì)菌內(nèi)毒素發(fā)生反應(yīng)的檢測(cè)試劑。與之相對(duì)，常規(guī)的鱟試劑除了能夠檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素外，還可能與真菌細(xì)胞壁成分如（1→3）-β-D-葡聚糖發(fā)生交叉反應(yīng)。
因此，細(xì)菌內(nèi)毒素特異性試劑在檢測(cè)過程中提供了更高的準(zhǔn)確性和特異性，避免了因非細(xì)菌內(nèi)毒素成分引起的假陽(yáng)性結(jié)果。
二、單次檢測(cè)與多次檢測(cè)的區(qū)別
（一）單次檢測(cè)：在這種檢測(cè)方式中，單次分量的鱟試劑已預(yù)先被添加到反應(yīng)試管中。檢測(cè)時(shí)，只需將一定體積的測(cè)試溶液加入試管，即可進(jìn)行內(nèi)毒素的檢測(cè)。這種方式簡(jiǎn)化了操作步驟，適用于快速、高效的檢測(cè)需求。
（二）多次檢測(cè)：在多次檢測(cè)中，鱟試劑首先需要用細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)用水進(jìn)行溶解。然后，將溶解后的鱟試劑按一定等分量分配到反應(yīng)試管或微孔板中，供后續(xù)多次檢測(cè)使用。這種方式雖然操作相對(duì)復(fù)雜，但能夠靈活應(yīng)對(duì)大量樣本的檢測(cè)需求，且降低了試劑的浪費(fèi)。
三、試劑的保存條件與期限
為了確保試劑的有效性和準(zhǔn)確性，所有試劑都應(yīng)冷藏保存。具體保存條件和期限如下：
▶▶Pyrotell® MTV（凝膠法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，直至產(chǎn)品有效期結(jié)束。
▶▶Pyrotell® STV（凝膠法鱟試劑）：同樣應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，直至產(chǎn)品有效期結(jié)束。
▶▶Pyrosate®（凝膠法內(nèi)毒素快速檢測(cè)試劑）：可在2℃至25℃之間保存，直至產(chǎn)品有效期。
▶▶Pyrotell®-T（濁度法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，并在復(fù)溶后于2-8℃下保存24小時(shí)，或-20℃下凍存3個(gè)月（只能凍融一次）。
▶▶Pyrochrome®（顯色法鱟試劑）：應(yīng)保存在-20℃至8℃之間，并在復(fù)溶后于2-8℃下保存8小時(shí)（不能凍存）。
▶▶PyroSmart NextGen® (重組鱟試劑)：鱟試劑和復(fù)溶緩沖液應(yīng)儲(chǔ)存于2-8℃環(huán)境中。使用前需恢復(fù)室溫至少30分鐘，并在復(fù)溶后室溫放置，于3-20分鐘內(nèi)使用。
▶▶細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（CSE）：0.5μg/vial的CSE（E0005）應(yīng)在2-8℃下保存，并在復(fù)溶后不超過4周內(nèi)使用（不能凍存）。系列稀釋前需至少渦旋30秒。125μg/vial的CSE（E0125）同樣應(yīng)在2-8℃下保存，并在復(fù)溶后不超過3個(gè)月內(nèi)使用（不能凍存）。系列稀釋前也需至少渦旋30秒。
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