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蛋白標(biāo)記定量的關(guān)鍵步驟與應(yīng)用

瀏覽次數(shù):711 發(fā)布日期:2024-2-26  來源:百泰派克生物科技

蛋白標(biāo)記定量(Protein Labeling Quantification)是一種用于分析蛋白質(zhì)表達和調(diào)控的實驗技術(shù),蛋白質(zhì)在實驗中會與特定的標(biāo)記分子結(jié)合,旨在量化分析特定蛋白質(zhì)或多個蛋白質(zhì)在不同樣品中的表達水平。

蛋白標(biāo)記定量的關(guān)鍵步驟通常包括:

1、蛋白質(zhì)提取:

 

首先從研究的生物樣本(如細胞、組織或體液)中提取蛋白質(zhì)。

2、蛋白質(zhì)標(biāo)記:

 

將蛋白質(zhì)與化學(xué)標(biāo)簽或同位素標(biāo)簽結(jié)合。這些標(biāo)簽可以是穩(wěn)定同位素標(biāo)記(如SILAC)、同位素標(biāo)記的氨基酸(如iTRAQ)或其他特定的化學(xué)標(biāo)記物。這些標(biāo)記允許研究人員在后續(xù)分析中區(qū)分和量化不同樣本中的相同蛋白質(zhì)。

圖1. 使用SILAC進行蛋白質(zhì)定量(Esthelle et al.,2019)

3、蛋白質(zhì)分離與鑒定:

 

通過液相色譜(LC)、二維凝膠電泳(2D-PAGE)等技術(shù)將蛋白質(zhì)分離。之后,通常使用質(zhì)譜(MS)技術(shù)對標(biāo)記的蛋白質(zhì)進行鑒定和定量。

4、數(shù)據(jù)分析:

 

利用生物信息學(xué)工具對獲得的數(shù)據(jù)進行分析,比較不同樣本或處理條件下的蛋白質(zhì)表達差異。

圖2. SIALC與Dimethyl標(biāo)記法對比

蛋白標(biāo)記定量服務(wù)在生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開發(fā)、疾病診斷等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用,特別是在研究蛋白質(zhì)如何在不同條件下表達和調(diào)控方面。通過定量分析蛋白質(zhì)的表達,研究人員可以更好地了解疾病的機理,發(fā)現(xiàn)潛在的生物標(biāo)記物,或評估藥物的效果。

發(fā)布者:北京百泰派克生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-67869385
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