Nucleofector電轉(zhuǎn)技術(shù)在重編程產(chǎn)生誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC) 中的應(yīng)用
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC) 是通過人工將干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入預(yù)成熟或成熟的體細(xì)胞，從已經(jīng)分化的細(xì)胞類型中衍生的多能干細(xì)胞。
由于其類似ESC的功能，iPSC已經(jīng)作為許多發(fā)育或疾病相關(guān)應(yīng)用的強(qiáng)大工具，幫助科學(xué)家進(jìn)一步確定發(fā)展機(jī)制或疾病發(fā)病機(jī)制，或作為進(jìn)行體外藥物篩選和毒性研究的新型人類疾病模型，并具有成為再生醫(yī)學(xué)新工具的巨大潛力。
科學(xué)家通過病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)或非病毒轉(zhuǎn)染將干細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子引入原代體細(xì)胞中，可以簡單地在實驗室中產(chǎn)生誘導(dǎo)的PSC。不同組合中使用的典型重編程因子是Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc，Nanog和Lin28。
最初，這些重編程因子通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)遞送到體細(xì)胞中，因其隨機(jī)整合的特性和重編程因子的長期存在對腫瘤抑制基因的潛在失活可能引起腫瘤生長，從而降低了它們對臨床的適用性。
因此，研究人員通過使用非整合 RNA 病毒或游離型載體甚至 mRNA 的非病毒遞送來探索替代方案。 龍沙的 Nucleofector™ 技術(shù)已被證明是用于 iPSC 生成的一種方便、高效且具有成本效益的非病毒替代品，目前正被世界各地的領(lǐng)先科學(xué)家使用。
Nucleofector™ 技術(shù)已被有效地用于重編程常見的細(xì)胞類型，如人外周血單核細(xì)胞 (PBMC)、真皮成纖維細(xì)胞或 CD34+ 造血祖/干細(xì)胞，以及更罕見的起始細(xì)胞類型，如脂肪干細(xì)胞或角質(zhì)形成細(xì)胞。
下面列出的鏈接和參考資料將提供一些指南，說明使用哪些 Nucleofector™ Kits 將重編程載體轉(zhuǎn)染到這些常用的細(xì)胞類型中。此外，為了設(shè)置您的方案，我們的主要細(xì)胞類型和相應(yīng)的優(yōu)化培養(yǎng)基可用作陽性對照。
Human PBMCs生成IPSC
| 對照細(xì)胞 | hPBMCs(Cat# CC-2702) |
| 細(xì)胞特異性培養(yǎng)基 | TheraPEAK™ X-VIVO 15 media (Cat# BEBP02-054Q) |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit(Cat# V4XP-3024)對于Nucleofector™ 2b系統(tǒng)Human T Cell Nucleofector™ Kit(Cat# VPA-1002) |
| 參考資料或方案 | 案例研究：Lonza L7™ hiPSC Reprogramming and hPSC Culture System（點(diǎn)擊查看）實驗方案\應(yīng)用數(shù)據(jù)\文獻(xiàn)列表：（點(diǎn)擊查看） |
Human Fibroblast生成IPSC
| 對照細(xì)胞 | Human Dermal Fibroblasts (Cat# CC-2511) |
| 細(xì)胞特異性培養(yǎng)基 | FGM™-2 Media (Cat# CC-3132) |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P2 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-2024)對于Nucleofector™ 2b系統(tǒng)Human Dermal Fibroblast Nucleofector™ Kit (Cat# VPD-1001) |
| 參考資料或方案 | 實驗方案\應(yīng)用數(shù)據(jù)\文獻(xiàn)列表：（點(diǎn)擊查看） |
Human CD34+造血干細(xì)胞生成IPSC
| 對照細(xì)胞 | Human Bone Marrow CD34+ Cells (Cat# 2M-101C)Human Cord Blood CD34+ Cells (Cat# 2C-101) |
| 細(xì)胞特異性培養(yǎng)基 | TheraPEAK X-VIVO media |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector™ X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-3024)對于Nucleofector 2b系統(tǒng)Human CD34+ Cell Nucleofector Kit (Cat# VPA-1003) |
| 參考資料或方案 | 案例研究：Generation of ipsc with cord blood cells with 4D-Nucleofector™ System（點(diǎn)擊查看）實驗方案\應(yīng)用數(shù)據(jù)\文獻(xiàn)列表：（點(diǎn)擊查看） |
Human Bone Marrow Mononuclear Cells生成IPSC
| 對照細(xì)胞 | Human Bone Marrow Mononuclear Cells (Cat# 2S-101D) |
| 細(xì)胞特異性培養(yǎng)基 | TheraPEAK X-VIVO media |
| Nucleofector 試劑盒 | 對于4D Nucleofector X 單元P3 Primary Cell 4D-Nucleofector™ X Kit (Cat# V4XP-3024) |
| 參考資料或方案 | 實驗方案\應(yīng)用數(shù)據(jù)\文獻(xiàn)列表：（點(diǎn)擊查看） |
