小鼠實驗中的給藥注意事項
Hello，大家好，我叫小白 ，是一只平平無奇的實驗室小白鼠，我有好多兄弟姐妹，小黑 (黑鼠)、小灰 (褐鼠)、小肉 (裸鼠)，還有幾位有著洋氣外文名的族人，NOG、NCG/NOG/NSG，看了下面這個圖，相信一定分得清了。
小白： 主人對小伙伴的身體進行了“深入”地探索后發(fā)現(xiàn)，腸道附近有多處“蛋花”樣的沉積物，或固體顆粒。
萌 Cece 建議：優(yōu)先建議選擇能溶解澄清的方案，當然確實有一些產(chǎn)品不溶于水，但還是會用生理鹽水/PBS 溶解成混懸狀態(tài)或沉淀給藥的報道，這種情況要慎重，一方面可借助研缽或超聲的方式將固體粉末研磨/超聲成盡可能的小顆粒，給藥體積也要盡可能小，調(diào)整合理的給藥頻次和劑量，強烈建議做預(yù)實驗。
萌 Cece 建議：玉米油、橄欖油、花生油和礦物油比較容易受污染，有研究論證，長期腹腔給藥會導(dǎo)致動物腹膜炎癥，其中花生油和礦物油引起較嚴重的腹膜炎癥，玉米油和橄欖油較輕 (減少巨噬細胞)，一方面，建議分裝密封保存，新鮮配置，另一方面優(yōu)先采用灌胃的給藥方式，如需腹腔注射，參照我們官網(wǎng)的建議，周期、給藥頻次、單次給藥體積都需謹慎設(shè)置。詳情可參考 MCE 官網(wǎng)的信息。
第五宗罪：用藥劑量太高
小白： 主人用高出腫瘤模型用藥的劑量直接用于關(guān)節(jié)炎模型。
萌 Cece 建議：優(yōu)先參考文獻中同類動物模型的劑量信息，如沒有，建議多做幾組劑量做比較。
■ 第六宗罪：過于粗暴
最后，鼠固有一死，或重于泰山，或輕于鴻毛，望主人們善待我們。
——自你們溫柔可愛的，善解人意的，
具有奉獻精神且無怨無悔的小白鼠
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2. Corn oil. MCE. https://www.medchemexpress.cn/Corn_oil.html
3. Haizhong Huo, et al. Erastin Disrupts Mitochondrial Permeability Transition Pore (mPTP) and Induces Apoptotic Death of Colorectal Cancer Cells. PLoS One. 2016; 11(5): e0154605.
4. Antonio Bruni, et al. Ferroptosis-inducing agents compromise in vitro human islet viability and function. Cell Death Dis. 2018 May 22; 9(6): 595.
5. Elisenda Alsina-Sanchis, et al. Intraperitoneal Oil Application Causes Local Inflammation with Depletion of Resident Peritoneal Macrophages. Mol Cancer Res. 2021 Feb;19(2):288-300.
卓越的天資讓我們家族成為少數(shù)模式生物之一。今日我們就是要澄清一些誤會，列了幾宗罪狀，希望主人們引以為戒。
■ 第一宗罪：給藥體積不是你想給多少就給多少
小白： 以腹腔給藥為例，建議的最佳體積在 5 mL-10 mL/kg，算下來 100-200 μL 左右 (PS: 敢情您打 1 mL 是為了少喂點水么？)，很多時候，這些液體里還有很大比例的 DMSO 等毒性溶劑，是藥三分毒，況且它還只是個和 (huo) 藥的。
萌 Cece 建議：小鼠單次腹腔給藥最佳體積 5 mL-10 mL/kg，在溶解度允許情況下適當減少給藥體積，用 DMSO 配制的母液時，對于正常小鼠或大鼠，建議 DMSO 的終濃度不要大于 10%；對于裸鼠或體弱小鼠或大鼠，建議 DMSO 的終濃度盡量不要超過 2%；對于正常小鼠，如果給藥頻率超過一天三次，建議 DMSO 的終濃度盡量不要超過 5%。也建議把動物的周齡/月齡考慮在內(nèi)，酌情調(diào)整。
■ 第二宗罪：有明顯肉眼可見的顆粒進行腹腔給藥
小白： 主人對小伙伴的身體進行了“深入”地探索后發(fā)現(xiàn)，腸道附近有多處“蛋花”樣的沉積物，或固體顆粒。
萌 Cece 建議：優(yōu)先建議選擇能溶解澄清的方案，當然確實有一些產(chǎn)品不溶于水，但還是會用生理鹽水/PBS 溶解成混懸狀態(tài)或沉淀給藥的報道，這種情況要慎重，一方面可借助研缽或超聲的方式將固體粉末研磨/超聲成盡可能的小顆粒，給藥體積也要盡可能小，調(diào)整合理的給藥頻次和劑量，強烈建議做預(yù)實驗。
■ 第三宗罪：連續(xù)多天用同一管稀釋液給藥
小白： 曾經(jīng)有位主人，用玉米油給我的小伙伴進行腹腔給藥，我眼見那管玉米油溶好的藥物都擱好多天了，似乎還有些細小的不明物，小伙伴沒扛過一周就去了。主人說小伙伴是因為感染死的，還說文獻里都是騙人的。萌 Cece 建議：玉米油、橄欖油、花生油和礦物油比較容易受污染，有研究論證，長期腹腔給藥會導(dǎo)致動物腹膜炎癥，其中花生油和礦物油引起較嚴重的腹膜炎癥，玉米油和橄欖油較輕 (減少巨噬細胞)，一方面，建議分裝密封保存，新鮮配置，另一方面優(yōu)先采用灌胃的給藥方式，如需腹腔注射，參照我們官網(wǎng)的建議，周期、給藥頻次、單次給藥體積都需謹慎設(shè)置。詳情可參考 MCE 官網(wǎng)的信息。
■ 第四宗罪：每天給藥多次，有機溶劑總比例高
小白： 腹腔給藥用 5% DMSO 配置，就打 100 μL，咋就快癱瘓了呢，主人很困惑。本小白也很困惑，主人，您一天打 6 次咋不說？
萌 Cece 建議：我們以雨蛙素 (Ceruletide) 這個產(chǎn)品為例吧。雨蛙素用于急性胰腺炎模型是需要隔一小時給一次藥，一天給藥 5-7 次，如果用 DMSO 配置，需要將 DMSO 終濃度降到很低很低，重要的是，雨蛙素本身水溶性非常好，這種情況首先建議用生理鹽水/PBS 現(xiàn)配給藥的。友情提醒，遇到雨蛙素這種產(chǎn)品，以及聯(lián)合用藥的情況，要按照比例和頻次及時、靈活調(diào)整給藥溶劑。
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第五宗罪：用藥劑量太高
小白： 主人用高出腫瘤模型用藥的劑量直接用于關(guān)節(jié)炎模型。
萌 Cece 建議：優(yōu)先參考文獻中同類動物模型的劑量信息，如沒有，建議多做幾組劑量做比較。
■ 第六宗罪：過于粗暴
小白： 肌注打穿腿，灌胃戳破食管，腹腔戳進內(nèi)臟。害，天冷時給藥前加熱一下吧。
最后，鼠固有一死，或重于泰山，或輕于鴻毛，望主人們善待我們。
——自你們溫柔可愛的，善解人意的，
具有奉獻精神且無怨無悔的小白鼠
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相關(guān)產(chǎn)品 |
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是一種中性的生物相容性親水聚合物。 |
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是一種表面活性劑，可以減少細菌附著并抑制生物膜的形成。 |
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是磺基丁基醚 β-cyclodextrin 衍生物，其用作賦形劑或配制劑以增加難溶性藥物的溶解度。 |
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是從玉米胚芽中提取出來的一種油，可作為藥物分子的載體。 |
參考文獻
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1. Patricia V Turner, et al. Administration of Substances to Laboratory Animals: Routes of Administration and Factors to Consider. J Am Assoc Lab Anim Sci. 2011 Sep; 50(5): 600-13.2. Corn oil. MCE. https://www.medchemexpress.cn/Corn_oil.html
3. Haizhong Huo, et al. Erastin Disrupts Mitochondrial Permeability Transition Pore (mPTP) and Induces Apoptotic Death of Colorectal Cancer Cells. PLoS One. 2016; 11(5): e0154605.
4. Antonio Bruni, et al. Ferroptosis-inducing agents compromise in vitro human islet viability and function. Cell Death Dis. 2018 May 22; 9(6): 595.
5. Elisenda Alsina-Sanchis, et al. Intraperitoneal Oil Application Causes Local Inflammation with Depletion of Resident Peritoneal Macrophages. Mol Cancer Res. 2021 Feb;19(2):288-300.
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