柱后衍生系統在河豚毒素檢測的新應用
去年游族創始人遭人投毒致死，英年早逝令人惋惜。據某些報道稱其中的毒之一就是河豚毒素。像這樣的河豚毒素中毒事件在日常生活中也有發生。近日，廣東省衛健委通報的廣東三起較大級別的食物中毒事件中，其中兩起為河豚毒素中毒，且中毒兩人均死亡。
什么是河豚毒素呢
河豚毒素（tetrodotoxin，TTX），分子式為C11H17O8N3，是鲀魚類（俗稱河豚魚）及其它生物體內含有的一種生物堿。河豚毒素為氨基全氫喹唑啉型化合物，是自然界中所發現的毒性最大的神經毒素之一，曾一度被認為是自然界中毒性最強的非蛋白類毒素。這種毒素主要作用于腸道，被腸道吸收后便會迅速作用于神經末梢和神經中樞，可高選擇性和高親和性地阻斷神經興奮膜上鈉離子通道，阻礙神經傳導，從而引起神經麻痹而致死亡。
河豚體內的毒性在各個部位不同，甚者季節也會影響河豚體內的毒性。據研究顯示，河豚在生殖季節毒性大，且雌性大于雄性，而在不同部位中，卵巢>脾臟>肝臟>血液>眼睛>鰓耙>皮膚>精巢。一般情況下，河豚的肌肉中是不含有毒素的，但河豚死后內臟中的毒素可少量地滲入肌肉中。
方法介紹
目前食品中河豚毒素的檢測主要依據GB 5009.206-2016，包括小鼠生物法、液相色譜-串聯質譜法、液相色譜-熒光檢測法和酶聯免疫吸附法。其中小鼠生物法雖為世界普遍的參考方法，但存在小鼠個體差別大導致結果異常的現象；液相色譜-串聯質譜法儀器成本高，對操作人員水平要求嚴格；酶聯免疫吸附法屬于半定量方法且商品化試劑盒較少；故采用液相色譜-熒光檢測法。為保證檢測結果更加精準可靠，普瑞邦特對該方法進行優化，采用諾爾液相搭配Pribolab®MDS多功能光電衍生系統進行河豚毒素的檢測。經液相色譜分離后，河豚毒素在Pribolab®MDS多功能光電衍生系統內與高溫的氫氧化鈉溶液反應，生成具有強熒光效應的C9堿，熒光檢測定量限為300ppb，滿足國標要求。
實驗條件
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色譜柱: C 18 柱,柱長 150mm ,內徑 4. 6mm ,粒徑 5 μ m ,或等效柱。
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流動相:乙腈 - 乙酸銨緩沖液( 5+95 ,體積比)。
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流速: 1. 0mL / min 。
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柱溫: 30℃ 。
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檢測波長:激發波長 385nm ,發射波長 505nm
注：如需優化后的方法，請與我們聯系
譜圖
上圖為1ppm河豚毒素柱后衍生產物熒光譜圖
耗材加油站
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產品編號/貨號 |
名稱 |
型號/規格 |
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PR-185150 |
C18色譜柱 |
15cm*4.6mm*5um |
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IAC-M10-3 |
河豚毒素免疫親和柱 |
25/50T |
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STD#M009 |
河豚毒素標準品 |
20ug/mL |
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EQ-EVP 3024 |
Pribolab®真菌毒素濃縮器 |
EQ-EVP24 |
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EQ-MDS2010/2020 |
Pribolab®MDS多功能光電衍生系統 |
MDS-3000/3100 |
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MSS3009 |
Pribolab®河豚毒素 |
1mg |
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