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扁豆凝集素(LCA)ELISA免費代測試劑盒使用方法

瀏覽次數(shù):980 發(fā)布日期:2020-12-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
扁豆凝集素(LCA)ELISA免費代測試劑盒說明書

【中文名稱】:扁豆凝集素(LCA)ELISA免費代測試劑盒
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T。
【保存條件】:2-8℃低溫保存
【保質(zhì)期】:6個月,所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】:酶標板,試劑,標準品等。ELISA試劑盒檢測范圍:人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。 主要用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。
扁豆凝集素(LCA)ELISA免費代測試劑盒實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中維生素C(VC)水平。用純化的維生素C(VC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入維生素C(VC),再與HRP標記的維生素C(VC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的維生素C(VC)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中維生素C(VC)濃度。 
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樣本處理及要求
 
.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
 
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
 
3. 不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 
扁豆凝集素(LCA)ELISA免費代測試劑盒操作步驟
 
.標準品的加樣:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL
 
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
 
3.加酶:每孔加入酶標試劑00μl,空白孔除外。
 
4.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
 
5.配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
 
6.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
 
7.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
 
8.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
 
9.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
注意事項
 
. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡5-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
 
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
 
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
 
4. 請每次測定的同時做標準曲線,zui好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
 
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
6. 底物請避光保存。
 
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
 
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
 
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
 
0. 試劑盒2-8℃冷藏,保質(zhì)期6個月。
 
發(fā)布者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:021-60443211
E-mail:3004967995@qq.com

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