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貼壁細胞不同狀態下消化培養技巧全攻略

瀏覽次數:895 發布日期:2024-4-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

細胞生長特性分為兩種,一種是貼壁一種是懸浮,不同的細胞形態對應的操作方法也大有不同,今天我們主要講解一下貼壁細胞的相關培養技巧。
 

在操作貼壁細胞的過程中,消化環節確實至關重要。消化時間的長短需要根據每個細胞的狀態進行精確調整,以確保細胞的健康和完整性。消化過度或消化不充分都可能對細胞造成不可逆的影響,因此,了解并準確判斷貼壁細胞的狀態對于確定消化時間至關重要。
 

貼壁細胞狀態,分為以下幾種:

1,疏松貼壁細胞

細胞傳代密度控制在80%左右最少不能低于60%,消化時間控制在1-2分鐘左右,傳代后48小時內不要動該細胞,讓其慢慢貼壁,需要觀察時也要輕拿輕放。
 

如果在液體中還存在未貼壁的細胞,可以在下次換液時通過離心收集這些細胞。這樣既能保證細胞的充分利用,又能避免未貼壁細胞對實驗結果的干擾。
 

2,容易分化的細胞

需使用較好的血清培養,盡量讓細胞生長密度高一些,消化時觀察細胞的形態變化,變圓后及時終止消化處理。
 

減少吹打次數,避免不必要的機械損傷;輕柔吹打,避免氣泡產生,細胞呈單個狀態即可。


3,生長緩慢的細胞

如果細胞突然生長緩慢,需考慮是否是試劑的批次問題,細胞污染等可能性。如果本身細胞生長較慢,需使用較好的血清培養,必要時可加大血清濃度(5%-10%左右),傳代時密度需在80%以上,密度太稀傳代會直接影響細胞的生長周期及狀態,傳代比例控制在1:2或1:3。


4,聚團成長的細胞

聚團成長的細胞不容易生長滿,在長到70%-80%左右就可以傳代,消化時觀察細胞的形態變化,細胞變圓并有少量細胞脫落即可終止消化,較難消化的細胞,可以分次消化,相對增加消化時間。
 

胰酶作為細胞貼壁工藝中的關鍵物料之一,酶活性、有無動物源等因素均至關重要。逐典TryPLUS消化液作為體外重組表達的胰酶類似物,與傳統胰酶的消化動力學相似,但區別與傳統胰酶,具有純度高,細胞毒性低,細胞消化溫和等特點,產品無動物源性,無需胰酶抑制劑,稀釋即可進行終止,并且能夠兼容多種細胞培養體系,定能成為您細胞培養工藝中的絕佳幫手!
 

逐典TrypLUS消化液優勢

1. DMF備案

2. 非動物來源

3. 室溫貯存,無需胰酶抑制劑,稀釋即可終止

4. 消化溫和,消化后細胞活性高

5. 即開即用,方便快捷

 


逐典TrypLUS消化液應用案例

 

 

 

發布者:上,|馳儀器有限公司
聯系電話:18521301252
E-mail:xiaojing.su@weichilab.com

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