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ChIP-seq(組蛋白)揭示H3K36me修飾影響溫度誘導(dǎo)的植物可變剪接和開(kāi)花
瀏覽次數(shù):1142 發(fā)布日期:2023-2-22 來(lái)源:本站
僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
2017年,荷蘭瓦格寧根大學(xué)分子實(shí)驗(yàn)室RGH Immink團(tuán)隊(duì)以“Histone H3 lysine 36 methylation affects temperature-induced alternative splicing and flowering in plants”在《Genome Biology》雜志上發(fā)表研究文章,該研究通過(guò)染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序(ChIP-seq)和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序(RNA-seq)揭示了H3K36me修飾對(duì)高溫誘導(dǎo)的擬南芥植物的可變剪接(Alternative splicing ,AS)和開(kāi)花具有重要的調(diào)控作用。
標(biāo)題:
Histone H3 lysine 36 methylation affects temperature-induced alternative splicing and flowering in plants(H3K36me修飾影響溫度誘導(dǎo)的擬南芥可變剪接和開(kāi)花)
發(fā)表期刊:
Genome Biology
發(fā)表日期:
2017年06月 01日
影響因子:
17.906
技術(shù):
染色質(zhì)免疫共沉淀測(cè)序(ChIP-seq)和RNA-seq
樣品:
背景和意義:
全球變暖嚴(yán)重影響植物的開(kāi)花時(shí)間和繁殖成功率。mRNA前體的可變剪接(AS)是植物環(huán)境溫度控制反應(yīng)的重要機(jī)制,但對(duì)其調(diào)控知之甚少。溫度升高通過(guò)改變關(guān)鍵調(diào)控基因的剪接促進(jìn)了擬南芥植物形態(tài)的變化以及從營(yíng)養(yǎng)階段向生殖階段的轉(zhuǎn)變。
本研究發(fā)現(xiàn)組蛋白標(biāo)記H3K36me3在剪接調(diào)節(jié)和植物對(duì)環(huán)境溫度波動(dòng)的可塑性中發(fā)揮了關(guān)鍵作用,為培育能夠更好地應(yīng)對(duì)氣候變化引起的環(huán)境變化的作物開(kāi)辟了新的前景。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):
研究結(jié)果
(1)溫度誘導(dǎo)的差異剪接事件的鑒定
環(huán)境溫度的變化會(huì)觸發(fā)許多關(guān)鍵調(diào)控基因(包括各種開(kāi)花時(shí)間調(diào)節(jié)因子)剪接的快速而穩(wěn)定的變化。
圖1:溫度誘導(dǎo)的差異剪接(DiS)事件動(dòng)態(tài)
不同條件下獲得顯著DiS事件的拼接百分比(PSI)熱圖。
檢測(cè)到開(kāi)花時(shí)間調(diào)節(jié)因子FLM(FLOWERING LOCUS M)和MAF2(MADS AFFECTING FLOWERING 2),及富含精氨酸/絲氨酸的溫度調(diào)節(jié)剪接因子RS40(RICH SPLICING FACTOR 40)的DiS事件部分基因模型,以及RNA-seq結(jié)果相應(yīng)繪圖區(qū)域。
溫度變化一天后DiS與完全差異表達(dá)基因(DEG)之間的重疊Venn圖。
(2)DiS基因在H3K36me3修飾中富集
在DiS基因中觀察到H3K36me3組蛋白標(biāo)記過(guò)表達(dá),且在溫度升高后觀察到標(biāo)記沉積變化,表明該標(biāo)記在調(diào)節(jié)環(huán)境溫度誘導(dǎo)的可變剪接(AS)中發(fā)揮了作用。
圖2:溫度誘導(dǎo)的DiS基因在H3K36me3中富集
不同類別的基因,H3K36me3在不同類別基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)(TSS)和轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)(TTS)周圍分布。
具有溫度誘導(dǎo)的DiS事件的目標(biāo)基因H3K36me3圖譜
(3)H3K36me3促進(jìn)調(diào)節(jié)溫度誘導(dǎo)的DiS事件
H3K36me3在擬南芥中調(diào)節(jié)溫度誘導(dǎo)的AS中發(fā)揮作用。
圖3:H3K36me3促進(jìn)調(diào)節(jié)溫度誘導(dǎo)的可變剪接
WT中鑒定的顯著DiS事件在16℃和25℃(ΔPSI)之間的PSI差異分布以及sdg8-2和sdg26-1中的相應(yīng)ΔPSI分布。
在WT 16℃和25℃的比較中,對(duì)于顯著的DiS事件,WT、sdg8-2和sdg26-1的絕對(duì)ΔPSI的經(jīng)驗(yàn)累積分布函數(shù)(ecdf)圖。根據(jù)Kolmogorov-Smirnov檢驗(yàn),WT和sdg8-2或sdg26-1之間的ΔPSI分布明顯不同。
DiS事件的兩個(gè)實(shí)例的部分基因模型和RNA-seq結(jié)果的相應(yīng)繪圖區(qū)域。
(4)H3K36me3蛋白 writers、erasers和readers的突變影響高溫誘導(dǎo)的開(kāi)花
H3K36me3 writers、erasers和readers中的突變會(huì)影響植物對(duì)環(huán)境溫度變化的反應(yīng),表明該組蛋白修飾在對(duì)該環(huán)境線索的可塑性中發(fā)揮了作用。
圖4:H3K36me3 writers、erasers和readers的突變影響溫度誘導(dǎo)的開(kāi)花
根據(jù)擬南芥中的適配器復(fù)合體模型,H3K36me3調(diào)節(jié)和剪接的卡通圖。H3K36me3修飾的組蛋白通過(guò)與剪接調(diào)節(jié)因子(SRs)如PTB互作的適配器(如MRG1和MRG2)相結(jié)合。剪接調(diào)節(jié)因子在促進(jìn)或預(yù)防AS中起著重要作用。
WT、sdg8-2和sdg26-1植物在16℃下持續(xù)生長(zhǎng)或五周后移到25°C的開(kāi)花時(shí)間。
WT、jmj30-1和jmj30-OE植物的開(kāi)花時(shí)間如(b)所示。JMJ30丟失增加了對(duì)溫度誘導(dǎo)開(kāi)花的反應(yīng),而JMJ30活性增加則相反。
WT、mrg1-1和mrg2-3植物的開(kāi)花時(shí)間如(b)所示。mrg1-1和mrg2-3植物對(duì)溫度的響應(yīng)較小。
結(jié)論:
mRNA前體的可變剪接(AS)是產(chǎn)生蛋白質(zhì)多樣性或調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄異構(gòu)體豐度的關(guān)鍵機(jī)制,包括轉(zhuǎn)錄組中的快速變化。在溫度傳感中,AS代表了一種在植物發(fā)育中賦予可塑性的快速而靈活的方法。剪接的共轉(zhuǎn)錄性質(zhì)為剪接和染色質(zhì)狀態(tài)之間的交叉調(diào)控提供了可能。在哺乳動(dòng)物中,組蛋白修飾有助于調(diào)節(jié)剪接。本研究展示了組蛋白修飾在植物AS調(diào)節(jié)中的直接作用。揭示了H3K36me3在擬南芥中控制溫度誘導(dǎo)的AS和溫度依賴性開(kāi)花時(shí)間調(diào)控的關(guān)鍵作用。
除關(guān)鍵調(diào)節(jié)基因的AS賦予可塑性之外,由于對(duì)環(huán)境條件變化的快速和可逆反應(yīng),本研究關(guān)于H3K36me3在這一過(guò)程中的作用發(fā)現(xiàn)為溫度誘導(dǎo)的AS記憶開(kāi)辟了有趣的前景。可以預(yù)測(cè)溫度變化通過(guò)H3K36me3沉積而在染色質(zhì)狀態(tài)中被記憶,從而導(dǎo)致特定的剪接模式,使植株在生命周期中記憶環(huán)境條件并適應(yīng)氣候快速變化。
參考文獻(xiàn):
Pajoro A, Severing E, Angenent GC, Immink RGH. Histone H3 lysine 36 methylation affects temperature-induced alternative splicing and flowering in plants. Genome Biol. 2017 Jun 1;18(1):102.
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