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細胞實驗室預防污染的幾個小技巧

瀏覽次數:1401 發布日期:2022-8-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
在我們進行細胞實驗時,最重要的是杜絕一切可能的污染源,如果造成污染,實驗結果就會出現偏差,所以必須重新檢測,這一套流程下來即浪費工作時間,又增加了實驗成本。而且以污染細胞和未污染細胞為基礎進行實驗時,有可能得到的實驗結果會截然不同。所以如何預防污染的發生是細胞實驗室最重要的一項工作。

如果實驗室引入一種新的細胞系,或者一直培養保存的細胞系,但對該細胞系從未鑒定或檢測過,就有可能給實驗室帶來污染。因此使用前應先鑒定新引入細胞系,或檢測保存的細胞系是否無污染。

細胞系STR分析已被權威機構作為金標準應用于細胞鑒定

對于培養基等試劑的選擇,必須在符合GMP/GLP規定的廠房生產,并且需要對血清進行常規污染檢測,以及建立良好的分裝習慣和體系。

所有分裝使用或備用的試劑(如血清、胰酶)都應該去記錄批次號,并且要保證實驗室干凈、衛生,實驗的設備是無菌的、以及操作環節無誤,這些做好了都可避免污染的發生。所以必須遵照嚴格的無菌操作規范和管理。

遵照嚴格的無菌操作規范和管理步驟:

1)利用合適的工具進行移液操作

如果移液操作過程誤操作,那么分裝樣品有可能存在污染。因此選擇合適的移液器和高品質耗材,是確保分裝樣品潔凈的保證。跟實驗室常用的雙按鈕移液器相比,單按鈕移液器能更好的減少氣溶膠污染,因為單按鈕移液器打出吸頭時活塞無需回彈,而且直接按下去。

2)「具有生物安全柜功能」的濾芯吸頭

移液操作中除移液器外,還可通過使用濾芯吸頭來降低氣溶膠污染。優先選用雙濾芯吸頭,它具有兩層濾芯和不同孔徑,確保超高的阻隔效率。其濾芯性能符合EN1822標準(空氣過濾的級別),具有HEPAE12級的過濾性能。

3)用培養瓶培養細胞,特別是透氣蓋培養瓶

相比培養皿或培養板,培養瓶只有瓶口可以與外界聯通,因此減少外界氣體及微生物與培養細胞接觸,減少污染的幾率。具有濾膜的透氣瓶蓋,可更加有效的防止細菌、病毒,以及支原體等的污染。

4)水浴設備必須做好清潔和維護

水也是主要污染源之一,所以在我們使用水浴設備進行細胞復蘇時,一定要注意防止細菌或霉菌的污染,相關設備要帶蓋,每周徹底清潔,水浴中可添加抑菌劑限制細菌增殖,錐形瓶/樣品管等從水浴中取出后,需進行有效消毒。相較而言,金屬浴可提供無污染的溫控條件。
發布者:智立中特(武漢)生物科技有限公司
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