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VisuTrack對曠場實驗、懸尾實驗及三箱社交實驗的同步檢測

瀏覽次數(shù):1792 發(fā)布日期:2022-5-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
三廂社交檢測
本部分實驗步驟根據(jù)相關(guān)文獻所報道的方法略作修改,用于評價小鼠對于陌生目標的社交偏好。實驗開始前,將小鼠放在行為測試房間適應(yīng)1 h,隨后將小鼠放入檢測廂中,檢測廂被白色的玻璃樹脂板分隔成三個聯(lián)通的空間。將陌生CD1小鼠隨機放進左側(cè)或右側(cè)箱子里的塑料籠里(與社會接觸實驗中使用的籠子相同),另外一側(cè)箱子的塑料籠子為空,去掉隔開箱子的玻璃樹脂板,使測試小鼠在三個箱子中自由活動 5min,記錄測試小鼠分別在兩個廂中的持續(xù)時間。
整個測試過程均由VisuTrack動物行為分析軟件(上海欣軟,中國)進行數(shù)據(jù)采集和分析。
曠場檢測(open field test,OFT)
參考相關(guān)文獻描述,并結(jié)合實驗室條件進行適應(yīng)性改變。訂制曠場檢測專用箱,首先將小鼠放入曠場檢測箱中,自由活動15 min,同時由 VisuTrack動物行為分析軟件進行拍攝、錄制和軌跡記錄,統(tǒng)計小鼠檢測箱中的運動總距離。本行為學可通過記錄小鼠的總運動距離來反映小鼠的運動能力。
懸尾檢測
參考相關(guān)文獻描述,結(jié)合VisuTrack動物行為分析軟件的自動分析功能,通過對小鼠不動時間的判定衡量小鼠的焦慮水平。將小鼠放入檢測房間適應(yīng) 1 h,首先用被剪裁過的塑料槍頭套在C57BL/6J 小鼠尾巴上,防止小鼠攀爬,醫(yī)用膠帶固定尾巴末端處,然后將其懸吊于懸尾檢測架上,小鼠距離地面高度約25 cm。因處于非正常的倒掛狀態(tài),小鼠表現(xiàn)出掙扎等行為,采用VisuTrack動物行為分析軟件進行記錄和觀察,實時分析并統(tǒng)計 6min 內(nèi)小鼠不動時間。
鈣信號光纖記錄
鈣信號光纖記錄(fiber photometry recording)是一種實時檢測細胞活性變化的手段。其原理是通過利用GCa MP6m,一種鈣離子濃度敏感蛋白,檢測特定神經(jīng)元內(nèi)鈣離子信號的變化情況,記錄生理條件下特定神經(jīng)元熒光信號的變化,根據(jù)熒光信號的變化來分析特定神經(jīng)元的活動,進而將神經(jīng)元信號的改變和行為學反應(yīng)聯(lián)系起來,研究神經(jīng)元的行為學功能。本課題主要記錄小鼠在焦慮抑郁相關(guān)的行為實驗范式下神經(jīng)元信號的改變。

首先采用 4周C57BL/6J小鼠 , 根據(jù)前所述的方法d CA3 注射AAV-Ca MKIIα-GCa MP6s-WPREs-p A 病毒,并在注射位置植埋光纖,待4周后,病毒充分表達,我們就將小鼠置于籠中,將其與一只CD1小鼠進行 5min接觸檢測,同時使用在體光纖記錄儀進行記錄,同時使用VisuTrack動物行為分析軟件對社交行為進行記錄,將其社交接觸信號和記錄的鈣信號進行偶聯(lián)分析,計算并統(tǒng)計在社交行為期間小鼠d CA3腦區(qū)中的 ΔF/F值。

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