乙酰化修飾蛋白組學技術介紹及案例分享
蛋白質乙酰化(Acetylation)是蛋白在乙酰基轉移酶(或非酶)的催化下，將乙酰基團轉移并添加在蛋白賴氨酸殘基或蛋白N端上的過程，在調控蛋白質功能、染色質結構和基因表達中起重要作用。
乙酰化修飾主要分為兩類：蛋白N端的乙酰化修飾和蛋白賴氨酸上的乙酰化修飾。N端乙酰化修飾大部分發生在真核生物的蛋白上，由N乙酰轉移酶(NATs)催化；賴氨酸上的乙酰化修飾是一個可逆的過程，主要由賴氨酸乙酰化酶(KATs)和賴氨酸去乙酰化酶(KDACs)催化。
應用方向
- 乙酰化修飾與細胞基因表達調控、表觀調控、細胞凋亡、細胞代謝、信號轉導、蛋白質穩定性等生理過程研究；
- 乙酰化引起的代謝疾病、代謝紊亂，腫瘤發生等疾病機理研究。
乙酰化生物學意義
- 調節DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用；
- 與其他PTMs發生crosstalk；
- 調節酶活性；
- 調控蛋白亞細胞定位。
實驗流程
技術參數
寄樣要求
- 動物及臨床組織標本：200 mg/sample
血清、血漿：500 uL/sample
細胞﹑微生物：1× 108cells/sample
植物嫩葉、嫩芽：10g/sample
植物種子、果實：10g/sample
- 液氮或-80℃保存
- 足量干冰運輸，避免反復凍融
案例分享
Title(標題):Fungal-induced protein hyperacetylation in maize identified by acetylome profiling
發表期刊:PNAS
影響因子:9.504
技術方法:iTRAQ、乙酰化修飾定量蛋白組
研究內容
賴氨酸乙酰化是一種關鍵的翻譯后修飾，調節一系列生物過程中涉及的多種蛋白質。已知編碼乙酰轉移酶的病原體效應蛋白可以直接乙酰化宿主蛋白從而改變免疫過程。胭脂蟲毒素(HCT),一種由真菌玉米圓斑病菌種1(C. carbonum race 1)產生的組蛋白去乙酰化酶抑制劑,可以增強病原體感染玉米植物的能力。
組蛋白乙酰化狀態的改變在宿主-病原體相互作用中起著核心作用。關于HCT如何實際促進毒性的機理仍然未知。因此作者選擇hmlA玉米突變株作為研究對象，該突變株是編碼依賴NADPH的HC-毒素還原酶(HCTR)缺陷型，不能使HCT失活，表現出對C. carbonum race 1的易感。應用iTRAQ標記蛋白組和乙酰化修飾蛋白組技術研究玉米真菌誘導機制。
富集抗體
Anti-acetyl-lysine antibody(lmmuneChem-lCP0388)
技術路線
研究結果
發生乙酰化修飾的玉米蛋白
參考文獻下載鏈接
https://pan.baidu.com/s/1hbW_MxElgSSpaWoNpZ61qw
提取碼：srng
