成年大小鼠心肌細(xì)胞分離操作方法的技術(shù)改進(jìn)歷程匯總
近年來(lái)，隨著心臟電生理研究的不斷深入和細(xì)胞分子生物學(xué)在心血管研究領(lǐng)域的不斷普及，成年大小鼠心肌細(xì)胞已廣泛用于成熟心肌細(xì)胞離子通道、蛋白免疫化學(xué)、心肌病及心肌梗塞等模型的實(shí)驗(yàn)研究中。成熟心肌細(xì)胞不僅在結(jié)構(gòu)和功能上更接近在體細(xì)胞，并且成熟心肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)模型可以排除成纖維細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。
心臟由心肌細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞組成。心肌細(xì)胞占心臟總體積的75%,但細(xì)胞數(shù)僅占心臟細(xì)胞總數(shù)的1/3。出生后心肌細(xì)胞喪失增值能力，是高度分化的終末細(xì)胞，主司收縮功能。間質(zhì)細(xì)胞由成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等組成。成纖維細(xì)胞占間質(zhì)細(xì)胞90%以上，成纖維細(xì)胞具有分泌功能，合成和分泌生物活性物質(zhì)，調(diào)節(jié)自身膠原的產(chǎn)生及周圍心肌細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能。
心肌細(xì)胞按生理功能分為兩類:一類為工作細(xì)胞,包括心房肌及心室肌,胞漿內(nèi)含有大量肌原纖維,因而具有收縮功能,主要起機(jī)械收縮作用。除此以外,還具有興奮性、傳導(dǎo)性而無(wú)自律性。另一類為特殊分化的心肌細(xì)胞,包括分布在竇房結(jié)、房間束與結(jié)間束、房室交界、房室束和普肯耶纖維中的一些特殊分化的心肌細(xì)胞,胞漿中沒(méi)有或很少有肌原纖維,因而無(wú)收縮功能,主要具有自律性,有自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律的能力,同時(shí)具有興奮性、傳導(dǎo)性。無(wú)論工作細(xì)胞還是自律細(xì)胞,其電生理特性都與細(xì)胞上的離子通道活動(dòng)有關(guān),跨膜離子流決定靜息膜電位和動(dòng)作電位的形成。
1969年Kono和Powell等先后應(yīng)用酶解法對(duì)成年大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行分離，1977年Jacobson成功進(jìn)行了成年大鼠心肌細(xì)胞的培養(yǎng)。龍西林等于1991年率先在國(guó)內(nèi)分離出成年大鼠心肌細(xì)胞。成年大小鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)難度較大，酶解法用于成年鼠心肌細(xì)胞的分離已有近五十年的歷史，但至今仍無(wú)統(tǒng)一方法可循。目前對(duì)于成年鼠心肌細(xì)胞的研究主要集中于大鼠心肌細(xì)胞，小鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)難度更高。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的興起，以及siRNA與microRNA等方面調(diào)控研究的不斷深入，對(duì)于體外分離的成年鼠心肌細(xì)胞的活性和成活率有了更高要求，這也對(duì)成年大小鼠心肌細(xì)胞分離和培養(yǎng)提出更高要求。齊氏生物在總結(jié)前人方法的基礎(chǔ)上，應(yīng)用改良的Langendolf方法進(jìn)行心臟多次灌流，分離得到的大小鼠心肌細(xì)胞純度高，成活率高，可用于心血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實(shí)驗(yàn)的要求。
文章鏈接：http://www.chiscientific.cn/wenxiandetail.aspx?ID=292
圖1.心臟結(jié)構(gòu)圖
心臟由心肌細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞組成。心肌細(xì)胞占心臟總體積的75%,但細(xì)胞數(shù)僅占心臟細(xì)胞總數(shù)的1/3。出生后心肌細(xì)胞喪失增值能力，是高度分化的終末細(xì)胞，主司收縮功能。間質(zhì)細(xì)胞由成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等組成。成纖維細(xì)胞占間質(zhì)細(xì)胞90%以上，成纖維細(xì)胞具有分泌功能，合成和分泌生物活性物質(zhì)，調(diào)節(jié)自身膠原的產(chǎn)生及周圍心肌細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能。
圖2.心臟細(xì)胞組成
心肌細(xì)胞按生理功能分為兩類:一類為工作細(xì)胞,包括心房肌及心室肌,胞漿內(nèi)含有大量肌原纖維,因而具有收縮功能,主要起機(jī)械收縮作用。除此以外,還具有興奮性、傳導(dǎo)性而無(wú)自律性。另一類為特殊分化的心肌細(xì)胞,包括分布在竇房結(jié)、房間束與結(jié)間束、房室交界、房室束和普肯耶纖維中的一些特殊分化的心肌細(xì)胞,胞漿中沒(méi)有或很少有肌原纖維,因而無(wú)收縮功能,主要具有自律性,有自動(dòng)產(chǎn)生節(jié)律的能力,同時(shí)具有興奮性、傳導(dǎo)性。無(wú)論工作細(xì)胞還是自律細(xì)胞,其電生理特性都與細(xì)胞上的離子通道活動(dòng)有關(guān),跨膜離子流決定靜息膜電位和動(dòng)作電位的形成。
圖3成年大鼠心肌細(xì)胞（來(lái)源：齊氏生物）
1969年Kono和Powell等先后應(yīng)用酶解法對(duì)成年大鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行分離，1977年Jacobson成功進(jìn)行了成年大鼠心肌細(xì)胞的培養(yǎng)。龍西林等于1991年率先在國(guó)內(nèi)分離出成年大鼠心肌細(xì)胞。成年大小鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)難度較大，酶解法用于成年鼠心肌細(xì)胞的分離已有近五十年的歷史，但至今仍無(wú)統(tǒng)一方法可循。目前對(duì)于成年鼠心肌細(xì)胞的研究主要集中于大鼠心肌細(xì)胞，小鼠心肌細(xì)胞的分離與培養(yǎng)難度更高。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的興起，以及siRNA與microRNA等方面調(diào)控研究的不斷深入，對(duì)于體外分離的成年鼠心肌細(xì)胞的活性和成活率有了更高要求，這也對(duì)成年大小鼠心肌細(xì)胞分離和培養(yǎng)提出更高要求。齊氏生物在總結(jié)前人方法的基礎(chǔ)上，應(yīng)用改良的Langendolf方法進(jìn)行心臟多次灌流，分離得到的大小鼠心肌細(xì)胞純度高，成活率高，可用于心血管疾病發(fā)生發(fā)展研究以及心血管藥物的研究及多種生理生化實(shí)驗(yàn)的要求。
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