微生物菌種​的保存方法：
1、低溫存法：①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。

2、脫水存法：①沙土保存法，能產(chǎn)孢子的細(xì)菌、放線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合，經(jīng)稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內(nèi),裝置高度為1cm;滅菌2～3次，烘干后即可將在斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好的孢子，用無(wú)菌蒸餾水2～2.5ml制成孢子懸液，吸取少許加入沙土管中，經(jīng)真空抽干，外觀呈松散狀態(tài),于4℃冰箱保存，保存期可達(dá)5～7年。② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護(hù)劑（一般用脫脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管內(nèi)于-20～-30℃的乙醇浴中速凍。然后，在低溫下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽結(jié)凍，熔封安瓿管，于低溫下保存。保存期可達(dá)5～10年之久。③ 石蠟油封存法，在斜面菌種培養(yǎng)物上,倒上滅菌后的石蠟油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低溫干燥處保存，此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物，保存期為一年以上。

微生物菌種​的分離方法：
(1)施加選擇性壓力分離法：主要是利用不同種類的微生物其生長(zhǎng)繁殖對(duì)環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)的要求不同,如溫度、 pH 、滲透壓、 氧氣、碳源、氮源等,人為控制這些條件,使之利于某類或某種微生物生長(zhǎng),而不利于其他 種類微生物的生存, 以達(dá)到使目的菌種占優(yōu)勢(shì). 而得以快速分離純化的目的。 如可以控制培 養(yǎng)時(shí)的氧, 可將好氧微生物和厭氧微生物分開; 通過控制溫度, 可將嗜熱微生物和非嗜熱微 生物分開;控制 pH ,可將嗜酸、嗜堿微生物分離等。在分離培養(yǎng)基中也可以加入不同的抗 生素或試劑來(lái)增加選擇性。如在分離放線菌和細(xì)菌時(shí),可加入抗真菌抗生素;分離真菌時(shí), 可加入抗細(xì)菌藥物。

(2)隨機(jī)分離方法：有些微生物的產(chǎn)物對(duì)篩選沒有直接的選擇性指示作用,因此常采用隨機(jī)分離方法分離。 A 、抗生素產(chǎn)生菌的分離。抗生素產(chǎn)生菌的分離常用抑菌圈法。 實(shí)驗(yàn)必須用工具菌:采用抗生素的敏感菌, 傳統(tǒng)上常用 金黃色葡萄球菌和枯草桿菌。B、抗腫瘤藥物產(chǎn)生菌的分離。抗腫瘤藥物產(chǎn)生菌的分離常用方法:生化誘導(dǎo)法、 SOS 生色檢測(cè)法、 DNA 修復(fù)能力突變株。 原理是利用 DNA 的損傷,微生物發(fā)生突變。

(3)目的微生物分離：A 、根據(jù)形態(tài)篩選突變株；B 、根據(jù)平板菌落生化反應(yīng)篩選變株；
透明圈法、呈色圈法、抑菌圈法、渾濁圈法等。