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淺析溶血對生物樣本分析的影響

瀏覽次數:3150 發布日期:2020-7-6  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
 溶血指的是紅細胞破裂,血紅蛋白逸出釋放到血漿或血清中,可發生在體內和體外,影響溶血的因素也十分復雜。血漿血清發生溶血后,許多生理成分如血紅蛋白、膽紅素、磷脂等明顯增加,這些成分可能會影響溶血樣品中藥物的檢測。生物藥物分析的樣品一般為血漿或血清樣品,存在被測樣品少,樣品復雜及干擾物質多等問題,而且在實際的生物樣品分析工作中,采集的血漿或血清樣品常出現溶血的現象。
在進行生物藥物分析時,溶血的發生會影響待測物的色譜分離,溶血基質中可能會有一些特有的、與待測物質的共流出的內源性干擾;也可能影響待測物在質譜檢測中的基質效應,甚至紅細胞中釋放出的酶可能影響待測物的穩定性。溶血導致的樣品測定數據不準確,將直接影響藥物的藥動學研究,生物樣本分析常包含在一些藥代動力學外包機構提供的服務中。
LC-MS/MS技術的應用,可獲得豐富、有效的化合物結構信息,建立快速、高效的分析研究體系,目前已成為體內生物藥物分析的重要方法。血漿樣本中原型藥物及代謝物的LC-MS測定法及其制劑的藥動學和人體生物等效性研究在藥物研發中至關重要。藥動學在不同方面的應用有利于為臨床的安全用藥提供相關依據,也能讓研究者更好的了解藥物特性。美迪西提供藥代動力學外包服務,藥代動力學實驗室已經通過CFDA的GLP認證,實驗研究遵循ICH、CFDA和FDA的指導原則,可以根據客戶需求設計并開展體內、體外藥代動力學試驗,為客戶提供一整套藥動學評價和優化服務。
在對生物樣本進行分析時,要避免血清或者血漿樣品出現溶血現象,溶血的發生一般有以下原因:
(1)溶血的發生可能是由于疾病狀態、生理狀況等體內因素導致的。
(2)溶血的發生和樣本收集過程有直接的關系,如采血針口徑過小、抽血速度過快、采血點選擇不當、止血帶使用過久、采血管未充滿、采血后過度混搖、運輸過程中過度震蕩等,都會造成溶血。
(3)在轉運、儲存過程操作不當,如傳輸過程中劇烈震蕩;轉運時間長;轉運車溫度過高、劇烈震蕩等也會造成溶血。
其中,體外因素是造成溶血的主要原因。血漿或血清樣品一般是在不同時間點采集的,涉及周期長,影響因素多,溶血樣品的產生很難避免,因此研究人員需提前做好人員培訓,密切關注血樣采集的全過程,減少采集、離心、凍存及轉移任何一個環節可能發生的溶血。
據網上報道,溶血發生后會對生物樣品分析造成以下后果:
(1)影響藥物的穩定性,紅細胞破裂釋放的酶可能造成藥物在溶血血漿中不穩定,研究表明激素、維生素、嗎啡等在溶血血漿中穩定性受到影響。
(2)影響與紅細胞有高親和力的藥物,使測定濃度比實際濃度偏高,藥物濃度可高數百倍,如輕微的溶血現象可使甲醋唑胺的濃度顯著提高。
(3)影響血漿結合率高的藥物,細胞內液造成藥物稀釋,測定濃度比實際濃度偏低。
(4)溶血使細胞生理成分增加,造成離子抑制或增強,基質效應顯著,影響目標分析物的測定。
總之,對于生化檢測來說,溶血現象的發生會引起檢測的誤差,造成檢驗質量下降等問題,為了提高生物藥物分析的準確性,需要對溶血現象的原因進行深入的分析,并找出解決問題的辦法。
 
發布者:上海美迪西生物醫藥有限公司
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