耗散型石英晶體微天平與拉曼光譜的聯(lián)用--細胞色素在硫化土桿菌生物膜的胞外電子轉(zhuǎn)移途徑研究
 
 
具有電活性的細菌存在于各種各樣的環(huán)境中，從土壤/水，到深海火山口，再到人體消化系統(tǒng)。而在科技方面，電活性細菌在燃料電池，微生物合成化學以及半人工光合作用組件中展現(xiàn)出應用前景。盡管人們對電活性細菌的認知已經(jīng)超過了一個世紀，但是仍舊無法闡明電極與細菌之間電荷轉(zhuǎn)移的精確機制。在這篇文章中，作者首次將耗散型石英晶體微天平（QCM-D）和拉曼光譜兩種技術進行聯(lián)用，同時結(jié)合其他的分析手段對硫化土桿菌這類電活性細菌進行了深入分析。
  實驗中，作者使用定制的QCM-D/拉曼聯(lián)用模塊，使得兩臺儀器可以同時進行在線原位測試。通過QCM-D光學窗口，使拉曼光源直接入射到芯片表面。在測試芯片選擇中，作者使用了一種10微米鍍層的多孔ITO導電玻璃表面，這使得表面可以自由地進行細菌物質(zhì)吸附，導電性不受影響；并且ITO鍍膜可以使得拉曼光源強度不受損失。
  測試時，作者將硫化土桿菌通入到芯片表面，通過調(diào)節(jié)表面電位~0.3 V vs SHE標準氫電極（紅色曲線，下同）并在無氧環(huán)境中進行長期觀測。當細菌吸附芯片表面后，可以看到耗散值出現(xiàn)了上升，這是由于細菌沉淀和吸附于電極表面導致的粘彈性增大造成。電流在隨后的12小時仍舊保持在0左右。 隨著時間的逐漸增加，耗散的變大趨勢漸增，但仍處于生物膜生長初期。隨后耗散增加趨于緩慢，并在2-3天時快速上升。此時，表面電流也快速增加，作者解釋電流的增加與每個細菌細胞中細胞色素在胞外電荷轉(zhuǎn)移（EET）中的表達增強有關。隨著后期細菌生長，小部分的生物膜脫落導致的耗散斷崖式降低也與電流變化呈一致。
 
試驗后期作者使用無菌陰極溶劑沖洗芯片表面，并保持電位于~0.44 V vs SHE（藍色曲線）。電流穩(wěn)定維持在-0.02mA/cm²，此時芯片表面無質(zhì)量變化。實驗也即證明了當切換到陰極模式時，細胞色素被抑制，而生物膜的質(zhì)量大部分保留。
 
作者對原位拉曼數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)進行了綜合分析，得出細胞外的色素表達對陽極的生長階段至關重要，陰極條件下，細胞色素會部分降解，并且本身的鐵元素可能被用作細胞外電荷轉(zhuǎn)移（EET）過程的可溶性氧化還原物質(zhì)。
 
該論文近期發(fā)表于美國化學會志，DOI:10.1021/jacs.9b13077, 版權歸原文作者所有，更多QCM-D技術和產(chǎn)品詳情請點擊鏈接了解, 或者致電百歐林。