白細胞介素33（IL33）屬于IL1細胞因子超家族的成員，在結構上IL33在其氨基端部分具有螺旋-角-螺旋結構，其中存在涉及染色質結合基序和核定位信號, 在羧基端部分是β-三葉結構域，可以與孤兒受體ST2結合^[1]。IL33可由多種類型細胞表達，包括成纖維細胞，肥大細胞，樹突細胞，巨噬細胞，成骨細胞，內皮細胞和上皮細胞。

研究表明，IL33對肺和腸道的固有粘膜免疫，氣道炎癥和外周抗原特異性反應具有重要意義。IL33通過刺激Th2型細胞以及各種免疫細胞包括嗜堿性粒細胞、肥大細胞、嗜酸性粒細胞和天然輔助細胞 (natural helper,NH) 等表達ST2并產生Th2細胞因子（如IL4、IL5、IL13和趨化因子等），在各種過敏性炎癥中發揮關鍵作用^[2]。當IL33、ST2和IL1RAcP組成受體復合物可以作為細胞因子的“警報素”，將信息轉移至胞內（ST2L和IL1RAcP是IL33作用所必需的）。IL33/ST2信號通路如下圖所示, ST2和IL1RAcP組成的受體復合物在細胞損傷或機械損傷期間釋放到細胞外，接收細胞外IL33信號導致Myd88、IRAK1/4和TRAF6募集，進一步促進轉錄因子NF-kB、JNK1/2和ERK1/2活化，引起炎癥反應。

研究表明胸腺基質淋巴細胞生成素 (TSLP) 主要對過敏原特異性IgE的產生/Th2分化有重要影響，與之不同的是IL33在哮喘發病機制對蛋白酶介導的與細胞損傷相關的先天性氣道炎癥至關重要^[3]。

綜上，越來越多的研究證實IL33在哮喘的發病中發揮重要作用，在全基因組相關性研究中發現，IL33及其受體基因是哮喘最敏感的基因，它可能是啟動和維持哮喘氣道炎癥的重要細胞因子，阻斷IL33與ST2的結合可能為哮喘治療提供新的途徑。百奧賽圖成功構建了人源化IL33哮喘模型小鼠，可為相關研究提供有力工具。

品系信息

IL33基因的RT-PCR分析

在純合子B-hIL33小鼠的脾細胞中可檢測到hIL33 mRNA，但未檢測到mIl-33 mRNA。通過ELISA分析野生型(WT)C57BL/6和純合子B-hIL33小鼠的肺研磨液，當用LPS處理時，小鼠IL33可在野生型小鼠中檢測到，而人IL33可在純合子B-hIL33小鼠中檢測到。ND，未檢出。n=3。

B-hIL33小鼠脾臟細胞亞群分析

從C57BL/6和B-hIL33小鼠(n=3)中分離脾細胞。采用流式細胞術測定白細胞亞群的比例。如上圖所示，純合子B-hIL33小鼠白細胞亞群的比例與C57BL/6小鼠相似，表明B細胞、T細胞、NK細胞、CD4⁺T細胞、CD8⁺T細胞、粒細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞和單核細胞的分化不受hIL33人源化的影響。

B-hIL33小鼠脾臟T細胞亞群分析

從C57BL/6和B-hIL33小鼠(n=3)的脾臟中分離淋巴細胞。流式細胞儀檢測其中T細胞亞群的比例。如上圖所示，純合子B-hIL33小鼠淋巴細胞亞群的比例與 C57BL/6小鼠相似，表明T細胞分化不受hIL33人源化的影響。 

哮喘模型示構建及抗體評價方案

哮喘模型BALF中免疫細胞數的變化

利用B-hIL33小鼠(n=5)構建哮喘模型并進行給藥處理，流式檢測BALF中免疫細胞比例。結果顯示與對照組相比Etokimab Anolog給藥組嗜酸性粒細胞明顯減少。B-hIL33小鼠是評價人源IL33抗體的有力工具。

哮喘模型中IgE的產生

在研究終點時采集血清，進行IgE水平檢測。結果顯示，接受Etokimab Anolog治療的小鼠體內IgE水平遠低于未接受治療的小鼠。

參考資料

[1] Yang F , Zhu P , Duan L , et al. IL33 and kidney disease (Review)[J]. Molecular Medicine Reports, 2016, 13(1):3-8

[2] Yasuda K , Muto T , Kawagoe T , et al. Contribution of IL-33-activated type II innate lymphoid cells to pulmonary eosinophilia in intestinal nematode-infected mice[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2012, 109(9):3451-3456.

[3] Oboki K, Nakae S, Matsumoto K, Saito H. IL-33 and Airway Inflammation. Allergy Asthma Immunol Res. 2011;3(2):81–88. doi:10.4168/aair.2011.3.2.81.

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