YSY Biotech 基因的故事   讓斑馬魚來為您講述
 
樣品，防止污染）；加樣完畢后，將 PCR 管快速離心，確保溶液和組織或細胞均位于 PCR 管
 
底部；
 

• 制備基因組模板

 

• PCR 管放入 PCR 儀中，啟動 PCR 程序：65℃×30min、95℃×5min、16℃×1min。基因組

 
模板若不立即使用，請放入-20℃保存。
 
3、目標基因的 PCR 擴增（以下試劑請自備）
 
3.1 取用新的 PCR 管，按下列順序組裝 PCR 反應體系：
 
20 ml 反應體系（產物直接凝膠電泳進行基因型鑒定用）
 
基因組 DNA 模板（步驟 2.2 所得）：1 ml
 
2 × PCR Master Mix：10 ml（自備）
 
正向引物（5mM）： 1ml （自備）
 
反向引物（5mM）： 1ml （自備）
 
超純水：   7 ml（自備）
 

• 組裝完畢后，將 PCR 管快速離心，確保所有溶液均位于 PCR 管底部；

 

• 將 PCR 管放入 PCR 儀中，啟動客戶自行設計的 PCR 程序完成 PCR 擴增。

 
4、PCR 產物驗證
 
取 2ml 擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳進行基因型鑒定；若需進一步測序，可將余下的產物直接送測
 
序；若需酶切鑒定，則在經 PCR 產物純化試劑盒純化后，用核酸酶內切酶進行酶切鑒定。
 
注：測序公司一般額外收取 5 元錢的切膠費用，請在送測前和測序公司確認無需切膠回收。
 
5、結果閱讀（基因突變及突變率分析）
 
如果基因型可由引物特異性識別，則通過將觀測 PCR 產物電泳結果確定基因型；通過測序確定基
 
因型的，其測序結果可通過人工閱讀測序的色譜圖，識別突變等位基因的基因型，確定突變率。核
 
酸內切酶酶切結果可通過對凝膠電泳條帶的灰度分析，確定突變率。

南京堯順禹生物一步法細胞基因型鑒定試劑盒可以免費試用！��！

如需申請可撥打電話：189 -1301 -8980