如何準(zhǔn)確評價 HTRF 細(xì)胞因子檢測與其細(xì)胞活性變化的關(guān)系？

細(xì)胞因子（Cytokine,CK）是一類能在細(xì)胞間傳遞信息、具有免疫調(diào)節(jié)和效應(yīng)功能的蛋白質(zhì)或小分子多肽。而其中的炎癥細(xì)胞因子作為其重要組成，主要是免疫系統(tǒng)細(xì)胞生成的具有許多強(qiáng)大生物學(xué)效應(yīng)的內(nèi)源性多肽,可介導(dǎo)多種免疫反應(yīng)。眾多炎癥細(xì)胞因子中，起主要作用的是TNF-α 、IL-1β、IL-6、IL-8等。

目前細(xì)胞因子的檢測手段有很多，常見的有免疫學(xué)檢測法和分子檢測法，其中免疫學(xué)檢測方法使用最廣泛，包括ELISA法、免疫斑點(diǎn)法、免疫熒光法、RIA檢測方法等。而最新的一種均相時間分辨熒光檢測技術(shù)（HTRF）所表現(xiàn)出的諸多優(yōu)勢，如快速、均相、靈敏和抗干擾等特點(diǎn)被大家所認(rèn)可，此方法也非常適合監(jiān)測細(xì)胞因子和趨化因子在細(xì)胞檢測過程中的釋放。通常，細(xì)胞因子釋放的調(diào)節(jié)依賴于使用藥物化合物來誘導(dǎo)或抑制它們的分泌。為了進(jìn)一步了解這些藥物的作用機(jī)制，需要我們仔細(xì)分析它們的作用，特別是對細(xì)胞活力的影響。

此篇應(yīng)用介紹了如何更好利用整合有 Molecular Devices Minimax300 細(xì)胞成像模塊的 SpectraMax i3x 多功能微孔板檢測平臺，對細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞活性進(jìn)行分析。該方法可以逐孔/逐細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞因子和細(xì)胞活性評定，并通過細(xì)胞形態(tài)來確定和歸一化其藥物的真實(shí)效果。