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Sage Science Pippin HT 簡易操作手冊

瀏覽次數:4805 發布日期:2018-6-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

 一 準備樣品 
樣品的前處理: 
1.  DNA 樣品的離子強度要比緩沖液的低 
2.  DNA 樣品是去蛋白  
3. 上樣量不超過 1.5ug 
4. 了解待回收的 DNA 片段大小 
5.  20ul DNA 樣品(TE 溶解)+5ul marker/上樣緩沖液(3%、2%、1.5%),混勻
震蕩離心。0.75%預置膠 20ulDNA 樣品+5ul 上樣緩沖液,marker 一個泳道直接 25ul。
 
二 編程 
Protocol Editor 界面下: 1. 選擇新建 Protocol 2. 選擇預制膠種類 3. 設置回收的片段大小 4. 指定參考泳道(內標/外標) 5. 默認選擇“洗提完成后終止”。 

三 光學校正(Pippin HT 校正系數是 0.7) 
將光學校正板黑色一面朝下,放到泳道卡槽內,點擊“校正”。每次實驗前都必
須要進行光路校正。 

四 準備預制膠 
1 檢查預制膠 
a 檢查預制膠中緩沖液量,不足加滿。 
b 檢查凝膠柱是否斷裂  
c 檢查是否有氣泡 
2 準備上樣 
a 排除洗提孔后面的氣泡 
b 撕掉密封條,將預制膠置于儀器槽內 
c 從上方的每個緩沖液孔中吸走 80ul 緩沖液(3%、2%、1.5%預置膠); 或者吸
走 150ul 緩沖液(0.75%預置膠)。 
d 清空洗提孔中的緩沖液, 加入 30ul 的新鮮緩沖液 
e 用膠帶封閉洗提孔 
f 檢查樣品孔溶液,不足時補滿至 40ul 
3 連續性檢查(測試電流。連續性跟溫度有關系,所以緩沖液要提前從冰箱中拿
出進行室溫平衡) 
五 上樣 
吸掉 30ul 緩沖液,加入 25ul 樣品,合上蓋。 
六 運行程序 
七 回收目的片段  

 

發布者:北京經日今典科技有限公司
聯系電話:010-82795029/62898741
E-mail:2575813474@qq.com

標簽: DNA片斷回收
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