樣品處理

(1)、用合適的方法誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；

(2)、懸浮細(xì)胞離心（1500rpm 離心 5min）收集；貼壁細(xì)胞用不含EDTA的胰酶消化并用含血清培養(yǎng)基洗一次（注：胰酶消化時(shí)間不易過長，否則容易引起假陽性）；或直接用Accutase酶消化（無需終止）；1500rpm 離心 5min收集細(xì)胞；

(3)、用PBS洗滌細(xì)胞兩次（1500rpm離心5min）收集1-5 X105細(xì)胞，棄上清；

(4)、制備1X Binding Buffer緩沖液：按10次分析的量計(jì)算，加1ml  5X Binding Buffer緩沖液到4ml的去離子水；

(5)、用500ul  1X Binding Buffer重懸細(xì)胞(第4步稀釋的緩沖液）

(6)、加入5ul annexin-V FITC和10ul PI

(7)、避光室溫孵育5分鐘

(8)、上機(jī)檢測(cè)

流式檢測(cè)

    流式分析Annexin-V FITC（放射波長=488nm；吸收波長=530nm）用FITC信號(hào)檢測(cè)（通常是FL1通道）；PI染液用PE信號(hào)檢測(cè)（通常是FL2通道）