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TL-2010S自動研磨儀DNA提取適用性評估

瀏覽次數(shù):2774 發(fā)布日期:2013-10-18  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
TL-2010S自動研磨儀推出至今,越來越多用戶體驗(yàn)了其在組織DNA提取中相對于手工研磨的方便性及高效性,近日我們在北京某診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室做了一組樣品對比實(shí)驗(yàn)。
 
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/DIV>
對比TL2010S中通量自動研磨儀與手工液氮法研磨后的新鮮組織樣本在 DNA提取、RNA 提取性能方面的差異,評估自動研磨儀的適用性。
實(shí)驗(yàn)材料及試劑
1.  實(shí)驗(yàn)材料: 將 10 例 FT 樣本分別用吸水紙吸干表面的水分后,稱重后分裝為2 管/例,20 mg±0.3 mg/管。
2.  實(shí)驗(yàn)試劑: 天根DP422 DNA/ RNA共提試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程
1.  研磨
【自動研磨】向離心管內(nèi)加入 300 μl 裂解液。將離心管放于液氮中,冷凍處理。
液氮冷凍處理后的離心管固定于自動研磨儀適配器中,向離心管中加入 2 粒 3
mm 磁珠。小心將適配器正確安裝至自動研磨儀上,設(shè)置研磨參數(shù): 5 輪循環(huán)數(shù),60 s/輪,10 s 間隔。啟動儀器,研磨組織。研磨后,再向離心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液總使用量為 600 μl) 。
【手工研磨】 取樣本放于研缽中,加入液氮后迅速研磨。將組織粉末轉(zhuǎn)移至離心管中,稱重后向其中加入 600 μl 裂解液。
2.  核酸提取、檢測及保存
將上述分別使用兩種研磨方法處理后的樣本,使用 DNA RNA 共提試劑盒同
時提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度計測定 DNA、 RNA 的濃度及純度。 DNA提取后于-20℃保存,RNA 于-80℃保存。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)論
自動研磨儀處理與手工液氮研磨處理后提取 FT 的 DNA、RNA 在濃度、純度上均無顯著性差異(成對檢驗(yàn) P>0.05) 。但手工研磨有較大的樣本損失率,對于DNA提取濃度較低的樣品來說,自動研磨儀可以做到樣品0損失,在DNA提取上有著明顯的優(yōu)勢,且手工處理的過程復(fù)雜、易交叉污染,操作所用時間等方面均不及TL2010S自動研磨儀,因此自動研磨儀對于DNA提取工作相對于手工研磨處理有很大優(yōu)勢。 
發(fā)布者:鼎昊源(天津)生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-58650065
E-mail:chenyajing@herosbio.com

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