黃曲霉毒素是一類(lèi)真菌（如黃曲霉和寄生曲霉）的有毒的代謝產(chǎn)物，它們具有很強(qiáng)的致癌性，主要存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽以及一些和人類(lèi)血液，動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。其毒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氰化物、砷化物和有機(jī)農(nóng)藥的毒性，其中以B₁毒性最大。當(dāng)人攝入量大時(shí)，可發(fā)生急性中毒，出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。當(dāng)微量持續(xù)攝入，可造成慢性中毒，生長(zhǎng)障礙，引起纖維性病變，致使纖維組織增生。

 

近年來(lái)，國(guó)家制定了多個(gè)檢測(cè)黃曲霉毒素的方法標(biāo)準(zhǔn)，并同時(shí)出臺(tái)食品及飼料中黃曲霉毒素的限量要求，可見(jiàn)黃曲霉毒素的危害之大，用有效方法檢測(cè)黃曲霉毒素，從而控制有毒食品對(duì)動(dòng)物和人體的危害至關(guān)重要，華安麥科作為國(guó)內(nèi)最早從事霉菌毒素檢測(cè)研究的高新技術(shù)企業(yè)對(duì)黃曲霉毒素檢測(cè)也有深刻的探索研究，下面就我們的實(shí)踐和大家分享一下。

 

 

 

 

怎么選擇檢測(cè)方法和不熟悉儀器檢測(cè)法困擾著很多檢測(cè)人員，這次主要給大家介紹一下儀器法中相對(duì)性?xún)r(jià)比高也是不少檢測(cè)人員常用的高效液相法（HPLC）：

 

 

樣品經(jīng)甲醇-水提取，提取液經(jīng)過(guò)濾、稀釋?zhuān)瑸V液經(jīng)過(guò)含有黃曲霉毒素特異抗體的免疫親和柱層析凈化，黃曲霉毒素交聯(lián)在層析介質(zhì)中的抗體上，此抗體對(duì)黃曲霉毒素B₁、B₂、G₁、G₂具有專(zhuān)一性，用水將免疫親和柱上雜質(zhì)除去，以甲醇通過(guò)免疫親和柱洗脫，再經(jīng)光化學(xué)衍生器柱后衍生，以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。

ToxinFast^®氣控操作架：含氣泵

ToxinFast^®玻璃微纖維濾紙 ：直徑11cm、孔徑1.5µm

ToxinFast^®玻璃試管：直徑12mm，長(zhǎng)75mm，無(wú)熒光特性

ToxinFast^®注射器：10ml、20ml

 

樣品粉碎——提取——洗脫液進(jìn)樣、親和柱凈化——化學(xué)衍生——檢測(cè)數(shù)值（做過(guò)液相的都知道這些步驟的，在這里就簡(jiǎn)單提一下，主要是為什么用到氣控操作架和化學(xué)衍生器在下面解釋一下�。�

在樣品粉碎后需要過(guò)親和柱凈化，也就是怎么方便親和柱使用操作的問(wèn)題，氣控操作架能有效地提高這個(gè)環(huán)節(jié)的工作效率（很方便操作的），如圖示：

1 連接組裝好的氣控操作架，將免疫親和柱、注射器針筒與氣控操作架連接

2 將處理后的溶液上樣；

3 調(diào)節(jié)空氣泵旋鈕以控制流速，使樣液以1-2d/s的速度流出；

4，待樣液完全排干，用去離子水或蒸餾水以2-3d/s的流速洗滌兩次，每次10ml；

5，待液體完全排干，將樣品瓶置于親和柱下方，上樣1ml甲醇以1d/s的速度流出至完全排干。

以上操作步驟是用免疫親和柱--高效液相法檢測(cè)黃曲霉毒素的必經(jīng)步驟，如使用氣控操作架就能很好的固定親和柱并以可控流速操作，既高效也能使操作誤差減到最小。

華安麥科ToxinFast^®氣控操作架具有6支可控支流，能同時(shí)有效檢測(cè)多個(gè)樣本，還適用于

1ml和3ml多種規(guī)格免疫親和柱。

由于黃曲霉具有較強(qiáng)的紫外吸收和產(chǎn)生熒光的特性，因此可以進(jìn)行HPLC-紫外或熒光檢測(cè)，但是同時(shí)黃曲霉毒素中的B₁、G₁由于其在含水的流動(dòng)相中容易產(chǎn)生熒光淬滅，因此在很多的實(shí)驗(yàn)中都會(huì)采用衍生法測(cè)定黃曲霉毒素。

衍生的方法也很多：有柱前的，柱后的，在線的，柱前衍生一般采用三氟醋酸(TFA)衍生，柱后衍生一般采用碘化或者溴化，還有采用在線的光化學(xué)衍生的，在線衍生的優(yōu)勢(shì)跟大家說(shuō)一下（無(wú)需任何化學(xué)試劑、對(duì)人員無(wú)傷害；無(wú)需人員直接操作、避免誤差; 無(wú)需擔(dān)心衍生液腐蝕檢測(cè)器）

 

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