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動(dòng)物基因組DNA快速提取試劑盒使用說明書

瀏覽次數(shù):3605 發(fā)布日期:2011-10-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
動(dòng)物基因組DNA 快速提取(50 次)
概述:
本方法用于動(dòng)物組織基因DNA 的快速提取,可提取107-108 動(dòng)物細(xì)胞,其質(zhì)量能夠滿足
各種分子生物學(xué)要求。
組成:
1.溶液A 1ml RNase A 10mg/ml。-20℃保存
2.溶液B 55ml
3.溶液C 100ml×2 兩瓶,均為100ml
4.溶液D 3ml Resin 用時(shí)充分混勻
5. 溶液E 50ml 洗液(用前加入75ml 無水酒精,充分混勻)
6.溶液F 20ml TE buffer
步驟:
1.稱取100-300mg 動(dòng)物組織,液氮研磨成粉狀,將粉末移入1.5ml 離心管中,加入1ml
溶液B,振蕩混勻,室溫放置5min。
2. 12000rpm 離心5min。
3.將上清移入5ml 離心管中,加入2.5ml 溶液C,20μl 溶液A ,50μl 溶液D,充分混勻,
室溫放置20min。
4. ≥8000rpm 離心5min,棄上清。
5. 加入1ml 溶液C,充分混勻,≥8000rpm 離心1min,棄上清。
6.加入1ml 溶液E,充分混勻,≥8000rpm 離心1min,棄上清。
7.重復(fù)步驟6。
8. ≥12000rpm,離心1min,吸干上清,室溫晾干約5-10min,使乙醇揮發(fā)殆盡。
9. 取溶液F 200-300μl,混勻,40-50℃水浴5min。
10.≥12000rpm 離心1min,取上清液即為DNA。
注:1.組織若多,可適當(dāng)加大溶液B 和溶液D 的用量,其它成份不變。
2.混勻一定要溫和,否則DNA 大分子將被打斷使部分降解。
3.用戶可依實(shí)驗(yàn)需要,適當(dāng)調(diào)整溶液F 加入量,溶液F 越少,DNA 濃度越高,但產(chǎn)量略有損失,若
想最大限度提高產(chǎn)量,可重復(fù)步驟9、10。兩次所得DNA 可合在一處。
發(fā)布者:上海鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司
聯(lián)系電話:021-62837819
E-mail:jjz@shdgsw.com

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