FITC標(biāo)記抗體-Chadwick氏法

瀏覽次數(shù)：1761　發(fā)布日期：2010-10-13　來(lái)源：www.pricells.com.cn

FITC標(biāo)記抗體-Chadwick氏法

試劑：

抗體球蛋白溶液、異硫氰酸熒光素、3%重碳酸鈉水溶液、pH8.0的0.01mol/L PBS、1%硫柳汞；

材料：

離心機(jī)及離心管、三角燒瓶（25ml）、冰槽、無(wú)菌吸管及毛細(xì)滴管、透析袋、玻璃棒、棉線及燒杯（500ml）等；

方法與步驟：

1. 抗體的準(zhǔn)備。用0—4℃ pH8.0的PBS將免疫球蛋白溶液濃度稀釋為30—40mg/ml，置于三角燒瓶?jī)?nèi)，放入冰槽中；

2. 熒光素的準(zhǔn)備。按每毫克免疫球蛋白加0.01mg熒光素計(jì)算，稱(chēng)取所需的熒光素量，用3%重碳酸鈉水溶液溶解；

3. 將上述已準(zhǔn)備好的抗體與熒光色素溶液等量混合，充分?jǐn)嚢瑁蛊湓?—4℃冰箱中結(jié)合18—24h；

4. 透析。熒光素與球蛋白結(jié)合完畢后，將球蛋白的溶液以2500r/min離心20min，除去其中少量的沉淀物后，裝入透析袋中再置于燒杯中，在0—4℃下用pH8.0的緩沖鹽溶液透析過(guò)夜；

5. 過(guò)柱。取透析過(guò)夜的標(biāo)記物，過(guò)葡萄糖凝膠G-25或G-50柱，分離出游離熒光素，收集標(biāo)記的熒光抗體進(jìn)行鑒定；

【點(diǎn)擊可查看武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司相關(guān)產(chǎn)品】

天天干亚洲_99久久免费国_亚洲国产精品成人久久久软件_亚洲成av人**亚洲成av**_精品中文字幕在线AⅤ_男女真实毛片视频图片