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DNA顯微注射轉(zhuǎn)基因大鼠小鼠模型造模構(gòu)建建立實驗外包服務(wù)
提供轉(zhuǎn)基因小鼠載體技術(shù)服務(wù);
服務(wù)類別:轉(zhuǎn)基因總訪問:3055
最后更新:2022-8-8半年訪問:2
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分子生物學(xué)服務(wù)
1)      轉(zhuǎn)基因載體          組織特異性啟動子、廣泛表達(dá)基因上調(diào)與下調(diào)啟動子、可控啟動子及各種熒光標(biāo)記和抗藥性標(biāo)記
2)      siRNA載體          干擾序列設(shè)計、篩選或由客戶提供已挑選好的干擾序列
3)      打靶載體             基于Cre-loxP或 Flp-FRT技術(shù)的位點特異性重組
4)      表達(dá)載體/病毒載體  客戶需提供含有目的基因的質(zhì)粒或cDNA模板
5)      定點突變服務(wù)         客戶需提供原始質(zhì)粒或DN**斷的測序結(jié)果
6)      PCR產(chǎn)物克隆        將PCR產(chǎn)物(3’端加A)克隆至T載體
表型鑒定服務(wù)
1)      基于lacZ和GFP報告基因的發(fā)育和基因表達(dá)分析
2)      Northern blot 或western blot
3)      行為學(xué)表型分析
4)      免疫組化分析
5)      RT-PCR

至善研究院提供轉(zhuǎn)基因和基因打靶技術(shù)服務(wù),為基因體內(nèi)功能研究提供穩(wěn)定可靠的技術(shù)平臺。核心服務(wù)內(nèi)容包括載體構(gòu)建、基因工程小鼠制備和表型分析。

載體構(gòu)建

1)      轉(zhuǎn)基因載體          組織特異性啟動子、廣泛表達(dá)基因上調(diào)與下調(diào)啟動子、可控啟動子及各種熒光標(biāo)記和抗藥性標(biāo)記

2)      siRNA載體          干擾序列設(shè)計、篩選或由客戶提供已挑選好的干擾序列

3)      基因打靶載體       基于Cre-loxP或 Flp-FRT技術(shù)的位點特異性重組

顯微注射

    將純化好的外源DNA 注射入約200枚胚胎原核中,胚胎移植到假孕母鼠體內(nèi)。仔鼠出生三周后,剪鼠尾進(jìn)行PCR鑒定,將陽性仔鼠給客戶。

干細(xì)胞囊胚注射

    由客戶提供胚胎干細(xì)胞,將處理好的胚胎干細(xì)胞注射入約60枚囊胚中,并將囊胚移植到假孕母鼠子宮內(nèi)。嵌合體仔鼠出生3個月后進(jìn)行配種獲得雜合子小鼠。仔鼠出生三周后,剪鼠尾進(jìn)行PCR鑒定,將陽性仔鼠交給客戶。

表型鑒定服務(wù)

1)      基于lacZ和GFP報告基因的發(fā)育和基因表達(dá)分析

2)      Northern blot 或western blot

3)      行為學(xué)表型分析

4)      免疫組化分析

5)      RT-PCR

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