多肽合成-生物素標(biāo)記肽

    親和素與生物素之間非常穩(wěn)定的、非共價(jià)作用在化學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域是最常運(yùn)用的工具之一。生物素是復(fù)合維生素B2的組成部份。它與雞清蛋白、親和素、真菌蛋白、鏈霉親和素均有較高親和性和結(jié)合力。

    生物素標(biāo)記可通過各種不同的linker或spacers與多肽隔離。一般建議引入linker如Ahx（一個(gè)6碳linker)讓生物素更穩(wěn)定或更靈活。

•         1、金源科提供N端或C端生物素標(biāo)記：Biotin (N端), Lys(Biotin)(middle), Lys(Biotin)(C端)。
•         2、帶有l(wèi)inker(Ahx)的生物素標(biāo)記: Biotin-Ahx (N端), Lys(Ahx-Biotin)(middle), Lys(Ahx-Biotin)(C端)。

蛋白研究領(lǐng)域的應(yīng)用

    在許多蛋白研究領(lǐng)域中，生物素標(biāo)記肽通常與親和素結(jié)合而被檢測或純化：: 免疫印跡（WB）、ELISA、免疫沉淀 (IP)、多肽親和純化、免疫組化 (IHC)、細(xì)胞表面標(biāo)記、流式細(xì)胞術(shù)/熒光激活細(xì)胞分類(FACS)。

•         1、鎖定蛋白或其他蛋白復(fù)合物，使用生物素化多肽作為誘餌可從某樣品中捕獲某一假定的結(jié)合成份。其中一個(gè)策略就是使用鏈霉親和素一步法捕獲體內(nèi)生物素化蛋白和串聯(lián)親和純化，即傳統(tǒng)親和標(biāo)簽（FLAG或6HIS）外加一個(gè)生物素多肽。
•         2、生物素-親和素的親和力越高，對(duì)洗脫條件的要求越嚴(yán)。這一特點(diǎn)將有效減少其他親和標(biāo)簽或天然抗體的背景結(jié)合。所以它很方便地用來確定兩個(gè)純化蛋白質(zhì)在各種緩沖液中的相互影響（結(jié)合）能力。
•         3、僅有很少的天然生物素蛋白。所以交叉反應(yīng)的機(jī)率非常低。生物素�；瘡亩�可以用來從細(xì)胞裂解液中獲得蛋白質(zhì)相互作用信息。