南模生物iPSC體外疾病模型研究平臺上線
誘導性多能干細胞（iPS）具有類似于胚胎干細胞的全能性，其能夠分化成特定的細胞，組織或器官。誘導多能干細胞 iPS 技術(shù)具有巨大的潛在應用價值，可以用于干細胞治療研究，構(gòu)建疾病模型，發(fā)現(xiàn)新的治療靶點或篩選新的藥物。近日南模生物推出的 iPS 疾病研究模型平臺擁有多年培養(yǎng)干細胞的經(jīng)驗和干細胞基因編輯技術(shù)，已建立穩(wěn)定的iPS誘導系統(tǒng)，可以提供高效的疾病研究模型。
1. iPSC 體外疾病模型的優(yōu)勢
1. 體外誘導的 iPSC 細胞可無限擴增和定向分化，有利于替代較難獲得的原代細胞系。
2. 患者體內(nèi)誘導出來的 iPSC 細胞，分化形成的類器官，有利于大規(guī)模的進行藥物篩選。
3. iPSC 細胞在體外更容易進行基因編輯，誘導分化細胞可以高效模擬疾病的治療。
2. iPSC 體外疾病模型服務內(nèi)容及交付周期
3. iPSC 體外疾病模型服務案例
3.1外周血單核細胞重編程為誘導多能干細胞（iPS）
通過密度梯度離心，將外周血中的單個核細胞分離出來。單個核細胞經(jīng)體外擴增后，電轉(zhuǎn)重編程質(zhì)粒 OCT3/4,SOX2,KLF4,L-MYC,LIN28。電轉(zhuǎn)第七天可見細胞貼壁，12-18 天 iPS 克隆逐漸形成，qPCR 驗證 iPS細胞相關基因均有表達。
注:A圖為紅系祖細胞重編程打靶day0；B圖為day7，細胞開始貼壁；C圖為day12，iPS克隆開始出現(xiàn)；D圖為day18，iPS克隆長成，邊緣清晰，細胞致密。
qPCR 驗證iPS細胞相關基因均有表達
3.2 iPS細胞和人胚胎干細胞的基因編輯
敲除示例：在基因CISH第三個外顯子內(nèi)選取sgRNA進行基因編輯，移碼突變造成CISH基因的敲除。
hiPSC-CISH-KO編輯方案
hiPSC-CISH-KO測序驗證
敲入示例：在人iPS細胞 NANOG基因后插入TdTomato熒光蛋白。
iPS-NANOG-2A-tdTomato編輯方案
iPS-NANOG-2A-tdTomato熒光表達驗證
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