近日，杭州費雪推出新品抗豬流行性腹瀉病毒（PEDV）單克隆抗體，這是針對 PEDV 的特異性抗體，在豬流行性腹瀉的診斷、預防及研究中具有重要作用，以下從多個方面進行詳細介紹：

一、基本概念
PEDV 是引起豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea，PED）的病原體，屬于冠狀病毒科。抗 PEDV 單克隆抗體是通過雜交瘤技術制備的，能特異性識別 PEDV 表面抗原（如 S 蛋白、N 蛋白等）的單一抗體分子，具有高度特異性和均一性。

二、制備方法
抗原制備：提取 PEDV 的特異性抗原（如 S 蛋白的高免疫原性區域），或通過基因工程技術表達重組抗原（如重組 S1 亞基）。
動物免疫：將抗原免疫小鼠（通常為 Balb/c 小鼠），刺激 B 淋巴細胞產生特異性抗體。
細胞融合：取免疫小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞。
篩選與克隆：通過間接 ELISA 等方法篩選出能穩定分泌抗 PEDV 抗體的雜交瘤細胞，經克隆化培養獲得單克隆細胞株。
抗體生產：通過小鼠腹腔注射或體外培養雜交瘤細胞，收集腹水或細胞培養上清，純化獲得單克隆抗體。

三、作用與應用
1. 診斷檢測
ELISA 檢測：用于檢測豬血清、糞便等樣本中的 PEDV 抗原或抗體，是 PEDV 感染的主要診斷方法之一。
免疫熒光（IF）與免疫組化（IHC）：通過標記抗體（如熒光素、酶標），在細胞或組織中定位 PEDV，輔助病理診斷。
膠體金試紙條：基于單克隆抗體的快速檢測試紙條，可用于豬場現場的 PEDV 抗原初篩。
2. 病毒研究
病毒結構與功能研究：通過單克隆抗體識別 PEDV 的特定抗原表位，分析病毒蛋白的空間結構、抗原性及變異規律。
中和試驗：篩選具有中和活性的單克隆抗體，研究其抑制病毒入侵宿主細胞的機制，為疫苗開發提供靶點。
3. 疫苗開發與評價
疫苗效力評估：檢測免疫豬血清中針對 PEDV 的中和抗體水平，評估疫苗誘導的免疫應答效果。
被動免疫應用：高滴度的中和單克隆抗體可作為 “生物制劑”，用于仔豬的緊急預防或治療（如口服或注射），尤其適用于 PEDV 爆發時的被動保護。

四、關鍵特性
特異性：僅識別 PEDV 的特定抗原表位，與其他豬腸道病毒（如豬傳染性胃腸炎病毒 TGEV、豬德爾塔冠狀病毒 PDCoV 等）無交叉反應。
中和活性：部分單克隆抗體具有中和病毒的能力，可阻斷 PEDV 與宿主細胞受體的結合，抑制病毒感染。
親和力：高親和力的單克隆抗體與抗原結合更穩定，可提高檢測靈敏度（如 ELISA 檢測中最低可檢測到 ng 級抗原）。
亞型覆蓋：由于 PEDV 存在基因變異（如 G1、G2 亞型），優質單克隆抗體需能覆蓋流行毒株的抗原表位，避免因病毒變異導致檢測或保護失效。

五、應用場景與注意事項
1. 豬場診斷場景
使用場景：當豬群出現腹瀉、嘔吐、脫水等癥狀時，采集糞便或腸組織樣本，用單克隆抗體 ELISA 試劑盒檢測 PEDV 抗原，輔助確診。
注意事項：糞便中的雜質可能干擾檢測，需預處理樣本；若樣本為陽性，需結合病毒分離或 RT-PCR 進一步確認。
2. 實驗室研究場景
使用場景：在細胞水平研究 PEDV 的感染機制時，用單克隆抗體標記病毒，通過流式細胞術或共聚焦顯微鏡觀察病毒與宿主細胞的相互作用。
注意事項：不同單克隆抗體的表位不同，需根據研究目的選擇針對 S 蛋白（中和相關）或 N 蛋白（檢測敏感）的抗體。
3. 疫苗研發場景
使用場景：評估新型 PEDV 疫苗（如滅活苗、亞單位苗）誘導的中和抗體效價，篩選高效疫苗株。
注意事項：需參考當前豬場流行的 PEDV 毒株亞型，選擇匹配的單克隆抗體進行中和試驗，避免因毒株變異導致評估偏差。