冷凍TEM薄片制備和冷凍體積成像的全新工作流程解決方案

蔡司冷凍關(guān)聯(lián)工作流程聯(lián)接了光學(xué)顯微鏡和雙束電鏡(FIB-SEM)，從而用于分析細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。
 

2021年，隨著蔡司冷凍關(guān)聯(lián)工作流程的發(fā)布，蔡司為生命科學(xué)研究團(tuán)體提供了一種新的軟硬件結(jié)合的冷凍顯微鏡解決方案。該工作流程將寬場顯微鏡、共聚焦顯微鏡和雙束電鏡(FIB-SEM)無縫地連接起來，且便于使用。該解決方案提供了針對(duì)冷凍關(guān)聯(lián)工作流程需求而優(yōu)化的硬件和軟件，從熒光大分子的定位到高襯度體積成像和用于冷凍電子斷層成像的薄片減薄。
 
冷凍關(guān)聯(lián)顯微鏡技術(shù)是一種新興的大分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)。由于細(xì)胞和組織的超微結(jié)構(gòu)可以不帶人為假象的保存下來，因此冷凍顯微鏡可以在接近自然的狀態(tài)下觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)。然而，這項(xiàng)技術(shù)卻給用戶帶來了復(fù)雜的挑戰(zhàn)，例如耗時(shí)的樣品制備和成像流程、去玻璃化、冰晶污染或樣品丟失。
 
“在蔡司，我們通常致力于確保研究人員能夠更快地采集數(shù)據(jù)，更好地分析數(shù)據(jù)。借助蔡司的冷凍關(guān)聯(lián)工作流程，我們正朝著簡化和優(yōu)化科學(xué)家的工作流程的方向邁出下一步，以便他們能夠完全專注于自己的研究。” 蔡司研究顯微鏡解決方案負(fù)責(zé)人Michael Albiez博士強(qiáng)調(diào)道。
 
各種研究領(lǐng)域，如細(xì)胞生物學(xué)、癌癥研究、植物科學(xué)和發(fā)育生物學(xué)，都將受益于冷凍顯微鏡獲得的超微結(jié)構(gòu)信息。蔡司冷凍關(guān)聯(lián)工作流程幫助研究人員更容易獲得這一先進(jìn)技術(shù)，使他們能夠更快地評(píng)估樣品的質(zhì)量，獲得高分辨率、高襯度的3D數(shù)據(jù)流，并簡化TEM薄片制備的工作流程。  

簡化的工作流程和樣本的安全傳輸

蔡司冷凍關(guān)聯(lián)工作流程聯(lián)接寬場顯微鏡或共聚焦顯微鏡（蔡司Axio Imager、蔡司LSM 900/980 with Airyscan）和雙束電鏡（蔡司Crossbeam），以實(shí)現(xiàn)體積成像和TEM薄片的高效制備。專用的配件簡化了工作流程，并有助于在顯微鏡之間安全的轉(zhuǎn)移玻璃化樣品。這些部件與冷凍關(guān)聯(lián)顯微鏡樣品臺(tái)臺(tái)Linkam CMS196V³和冷凍傳輸系統(tǒng)Quorum PP3010Z兼容。數(shù)據(jù)管理由蔡司聯(lián)用軟件ZEN Connect負(fù)責(zé)。這一系列的工具都有助于增強(qiáng)成像效果。
 

最高的成像性能貫穿全工作流程

得益于適用于冷凍成像的物鏡和蔡司Airyscan探測器的高靈敏度，蔡司共聚焦顯微系統(tǒng)能夠以高分辨率探測和定位蛋白質(zhì)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)，同時(shí)溫和的光照可以防止樣品去玻璃化。蔡司雙束電鏡Crossbeam提供了高襯度體積成像-甚至樣品沒有經(jīng)過重金屬染色。這兩種方式為徹底了解超微結(jié)構(gòu)提供了有價(jià)值的功能和結(jié)構(gòu)信息。
 

在室溫下使用可提高工作效率

不同于其他解決方案，該工作流程中使用的蔡司顯微鏡不僅可用于冷凍顯微鏡技術(shù)，也可用于室溫的應(yīng)用。將設(shè)備從冷凍狀態(tài)轉(zhuǎn)換為室溫狀態(tài)非�？焖偾覠o需專業(yè)技術(shù)。這種靈活性為用戶提供了更多的實(shí)驗(yàn)時(shí)間。成像平臺(tái)可以從更高的利用率和更快的投資回報(bào)中受益。