自1979年發明以來，Western Blot（WB）已成為生命科學領域最常用的研究方法之一，它是一種公認的、基于構建抗體-蛋白質復合物的蛋白質檢測與分析技術。今天，請各位隨小編一探WB的奇妙世界，我們來一起分析它最讓我們“糾結”的操作點，并找出解決方法！

首先，一個經典的WB流程長成這樣——

其次，我們在做WB時最常遇到的問題也是驚人的相似——樣品漂浮、蛋白條帶扭曲（無法準確判斷蛋白分子量）、轉膜后看不到帶藍色或橙色的指示條帶、抗體孵育不均勻導致曝光度差異很大（依然是會影響到蛋白表達量的估算）。

 

這些問題其實都或多或少與樣品前處理有關。也就是說，我們完全可以通過優化樣品處理手法，以及經驗累積，來獲得完美的WB結果。

表1：Western Blot常見問題分析

表2：德國IKA蛋白質免疫印跡套裝（產品詳情請見www.ika.cn）

表2中的產品簡介如下，德國品質，始終如一，值得您信賴——

* T10 標準型套裝：高速均質機，用于分散組織于緩沖液，可選配一次性分散頭，避免反復清潔導致的交叉污染

* DBH 1：金屬浴，用于迅速升溫的加熱反應，標配PT 1000.60溫度傳感器，可準確測量溫度并在大數顯屏上顯示，方便同時觀察設定溫度和實際溫度，帶有計時功能

* ICC basic eco 18：恒溫水浴，二元一體泵可確保極佳的升溫速率和溫度均一性，透明浴槽方便觀察，智能的高、低液位報警方便日常操作

* Vortex 2：渦旋振蕩器，用于劇烈混勻，可選配多種夾具，持久耐用，并可在振蕩多個EP管、試管時解放您的雙手，機身堅固穩定，避免移動產生撞擊風險

* KS 260基本型：振蕩搖床，混勻直徑10 mm，實際工作轉速范圍50 – 500 rpm，在低轉速下可長時間穩定運行，完全滿足生命科學實驗室的多種振蕩需求，可靈活選配多種夾具