Western blotting 技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針進行檢測。 Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。

 

儀器：高壓鍋、電動勻漿機、高速離心機、垂直板電泳轉移裝置、脫色搖床。

試劑：單去污劑裂解液、分離膠、4％濃縮loading、G250考馬斯亮藍溶液、5XSDS上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉移緩沖液、10X麗春紅染液、封閉液、TBST、TBS、顯影液、定影液、抗體、ECL化學發光試劑。

雜品與耗材：各種規格的吸頭、離心管和加樣器；各種規格的燒杯、量筒和平皿等玻璃器材；硝酸纖維素膜，乳膠手套，口罩，保鮮膜，X-光片夾，X-光片，計時器，吸水紙。

 

Western blotting 實驗流程：

樣本處理→→蛋白定量→→樣本均一化→→制膠→→上樣→→電泳→→轉膜→→染膜→→封閉→→雜交上一抗→→二抗→→顯色→→曝光→→數據處理→→膜的再生

 

 

 

 

 

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