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上海賽達藥業:關于血清使用的幾點建議

瀏覽次數:18044 發布日期:2003-5-4  來源:本站 本站原創,轉載請注明出處
1. 血清必須貯存在-20℃,如存放于4℃,請勿超過兩周。對于某些單位一次無法用完一瓶,可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清解凍時體積會增加10%,必須預留此膨脹體積的空間,否則易發生污染或容器凍裂的情形。
2. 我公司所提供的血清一般為200ml和400ml裝量,因此我們建議您在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管中分裝40-45ml。我們強烈建議您在溶解過程中,必須規則地將血清搖晃均勻,小心勿造成氣泡,使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。勿直接由-20℃放置至37℃環境下解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而產生沉淀。
3. 血清的滅活(heat-inactivation)一般是指56℃,30分鐘水浴加熱已完全解凍的血清。加熱過程中必須規則地搖晃均勻。此處理的目的是使血清中的補體成分(complement)去活化。但是,經過滅活處理的血清會因而造成沉淀物的顯著增多,且會影響血清的品質。所以,我公司所生產的細胞培養用牛血清不做滅活處理,由客戶自行選擇。而診斷試劑用血清在除菌過濾前均進行過滅活處理。
4. 您在使用血清的時候,勿將血清留置于37℃太久,如果在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分會因而受到破壞,影響血清的品質。
5. 我公司所提供的高融合型細胞培養用小牛血清和標準型細胞培養用小牛血清均采取100納米進口MILLIPORE濾器連續三次去除支原體的無菌過濾。若您在血清產品中發現懸浮物,除非必須去除,我們建議您將血清加入培養基內一起過濾,勿直接過濾血清。
6. 血清的沉淀物
6.1凝絮物:其產生的原因有多種,但普遍的原因是血清中的脂蛋白(lipoprotein)變形及解凍后血清中存在的纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沉淀物不會影響血清本身的品質。除非必須,如果您想減少這些沉淀物,我們建議您可用離心3000rpm,5min去除,或離心后取上清液加入培養基中一起除菌過濾。
6.2顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為是血清遭受污染,而將血清放置在37℃中欲培養此“微生物”,但在37℃環境下。又會使此沉淀物增多,更會誤認為微生物的增殖,但以培養細菌的培養基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點不會影響細胞的生長。

上海賽達生物藥業有限責任公司
電話 021-50803248-1164
傳真 021-50800457
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